Анализ на боррелиоз

Лабораторная диагностика

Серологическое исследование направлено на обнаружение антител IgM и IgG. Нужно отметить, что серологические анализа имеют ограниченные чувствительность и специфичность (см статью «Специфичность и чувствительность анализа»). При диагностике боррелиоза рекомендуется применять двухуровневый подход:

• Все образцы биологического материала, которые демонстрируют положительный или сомнительные результаты, для подтверждения должны проверяться стандартным методом Вестерн-блоттинг (вестерн-блот, белковый иммуноблот, англ. Western blot) с применением чувствительного анализа ELISA или РИФ (реакции иммунофлюоресценции). На ранних сроках боррелиоза (первые 4 недели) Western blot нужно проводить для определения IgM и IgG
• Образцы, которые при проведении ELISA или РИФ демонстрируют отрицательный результат, не требуют дальнейших исследований. Однако, при подозрении на ранний боррелиоз и отрицательным результатом ELISA, необходимо провести контрольные серологические анализы на этапе выздоровления (парные образцы сыворотки) позднее 2-х недель

Анализы, взятые у пациентов с диссеминированной или поздней стадией боррелиоза, демонстрируют высокий уровень IgG к Borrelia burgdorferi. Поэтому IgM-блоттинг следует применять только в течение 30 дней с момента заражения. Пациентам с персистирующей симптоматикой и положительными результатами анализов только на IgM, необходимо провести повторный Western blot через несколько недель. Если повторный анализ также демонстрирует сомнительные результаты (IgM – «+», IgG – «-»), это, вероятно, следует расценивать как ложноположительный результат, при этом нужно работать над альтернативным диагнозом. Ложноположительные результаты серологического анализа на боррелиоз может быть обусловлен кросс-реагирующими антителами при аутоиммунных нарушениях, сифилисе или инфекционном мононуклеозе (см статью «Инфекционный мононуклеоз: обзор данных»). Кроме этого, давний контакт или инфицирование также может быть причиной получения ложноположительного результата анализа.

У больных нейроборрелиозом сероположительные результаты анализа отмечаются в 90% случаев. Изменения в спинномозговой жидкости демонстрируют лимфомоноцитарный лейкоцитоз (< 1000 клеток/микролитр) и повышенный уровень белков и олигоклонального IgG.

Бактериологический посев (микробиологическое или культуральное исследование) инфицированной ткани является более прямым исследованием, чем серологический анализ. Однако бакпосев не назначают рутинно, так как эта процедура требует проведения инвазии, она сложная в исполнении и дорогостоящая. Исследования путем полимеразной цепной реакции (ПЦР) гораздо лучше, чем бакпосев, для таких образов биологического материала, как, например, суставная (синовиальная) жидкость, однако это исследование не получило широкого распространения. Чувствительность ПЦР является умеренной (50-70%) для образцов кожи и синовиальной жидкости, однако при исследовании ликвора чувствительность ПЦР низкая (10-30%).

Проведение электрокардиографии (ЭКГ) показано только пациентам с признаками и симптомами патологии сердечно-сосудистой системы.

Несмотря на то, что иммунизация при боррелиозе на сегодняшний день не доступна, ранее проведенная иммунизация может влиять на результаты анализов. Опыт исследования на животных демонстрирует, что вакцина Лайма с антигеном OspA, способствует образованию антител, способных приводить к положительному результату анализов ELISA. Также это может обусловить положительную полосу (даже несколько полос) на тестах Western blot на IgG (такая картина наблюдалась только при проведении экспресс-тестов).

При подозрении на коинфекцию Babesia microti и Anaplasma phagocytophilum, для подтверждения диагноза бабезиоза или эрлихиоза рекомендуется проведение серологического исследования. Также рекомендуется провести ПЦР и мазок периферической крови.

Что происходит с организмом после инфицирования?

Заболевание можно определить уже через 6-12 суток. Благодаря клиническим исследованиям, удалось научиться определять ранние и поздние периоды развития боррелиоза.

1. На первом этапе распространения наблюдаются кожные и общеинфекционные симптомы.
2. Вторая стадия наступает на 2-4 неделю с момента, когда инфицированный клещ укусил человека. В этот период наблюдается распространение вируса по всему организму.
3. Третья стадия может наступить как через несколько месяцев после заражения, так и спустя годы. Чаще всего это уже хроническое заболевание.

Главными симптомами на начальном этапе являются: повышение температуры, человека мучают постоянные боли в суставах и мышцах, сонливость, апатия, на месте укуса появляется красное пятно, размеры которого могут достигать 10 см.

При положительном результате анализа

Если анализ на боррелиоз оказался положительным, врач-инфекционист назначит лечение, причем его схема будет построена в зависимости от стадии заболевания. Больного изолируют и помещают в инфекционную больницу для прохождения курса лечения.

На ранних стадиях лечение будет эффективным, никаких последствий для организма не возникнет. На поздних стадиях, при поражении нервной системы, лечение не дает стопроцентного эффекта, в результате чего может наступить инвалидность.

При отрицательном результате анализа

Получение отрицательного анализа является поводом для снятия диагноза. Однако в случае, когда симптомы сохранились, стоит провести повторное исследование через несколько дней для того чтобы убедиться в отсутствии возбудителя в крови.

https://youtube.com/watch?v=QoWf2Gpu0ak

источник

Ложноположительный результат

Вероятность получения ложноположительного результата составляет 5-10% даже при использовании современных диагностических методик. В таких случаях анализы показывают наличие патогенных микроорганизмов у людей, которые не были заражены боррелиями.

Обычно ложноположительные результаты наблюдаются при наличии у больного других инфекций, вызванных деятельностью спирохет (например, сифилиса), но иногда их причина остается невыясненной.

Общие сведения

Прежде всего, что такое болезнь Лайма у человека? Болезнь Лайма представляет собой природно-очаговое бактериальное инфекционное заболевание с трансмиссивным путем передачи и полисистемным поражением опорно-двигательного аппарата, кожи, нервной системы и сердечно-сосудистой системы.

Широко распространенными синонимами заболевания в литературе являются клещевая эритема, иксодовый клещевой боррелиоз, лайм-боррелиоз, системный клещевой боррелиоз (Википедия). Как самостоятельная нозологическая форма заболевание определяется с 1984 г., после открытия связи нового вида боррелий с заболеванием. Код клещевого боррелиоза по МКБ-10: A69.2.

Случаи заболеваний Болезнью Лайма (БЛ) регистрируются на территории США, Европы и Азии. Природные очаги клещевого боррелиоза располагаются преимущественно в страхах с умеренным климатом в местах с лесным ландшафтом. Ареал распространения этого заболевания совпадает с ареалом обитания иксодовых клещей. Заболеваемость клещевым боррелиозом в РФ варьирует в пределах 5,5-11,5 %.

Природные очаги широко распространены в лесостепной/лесной зонах России на всем ее протяжении (от Балтийского побережья до Тихого океана). В природных очагах боррелии циркулируют между дикими животными и клещами. Среди инфекций, передаваемых при укусе клещей, болезнь Лайма является наиболее распространенной, на долю которой приходится около 64%.

Основная масса заболеваний приходится на весенне-летний период (с апреля по июнь включительно), однако, период заболеваемости зачастую смещается и зависит от погоды — чем раньше устанавливается теплая погода, тем быстрее пробуждаются/активизируются и нападают на человека клещи. На весенне-летний период приходится первый пик заболеваемости.

Второй пик приходится на период конец лета — начало осени (с августа по октябрь). БЛ болеют сельские и городские жители. При этом, в структуре заболеваемости доля горожан составляет почти 45%. Заражения людей происходит при посещении леса, во время отдыха в лесопарках внутри городской черты и даже на индивидуальных садово-огородных участках. Наибольшую активность иксодовые клещи проявляют в утренний/вечерний период, а наименьшую — в дождливую и жаркую погоду.

На территории России инфицированность клещей I. ricinus и Ixodes persulcatus боррелиями варьирует в широком диапазоне от 10 до 70%. При этом, около 15% клещей, кроме боррелий, инфицированы возбудителями эрлихиоза и/или клещевого энцефалита, что обуславливает высокий риск развития смешанной инфекции.

Антитела класса IgM к Borrelia burgdorferi

Серологический показатель ранних стадий инфекции спирохетами Borrelia.

Боррелиоз или болезнь Лайма (по названию местечка, в котором в 1975 г. было впервые выявлено заболевание) – распространённая, переносимая клещами инфекция. Возбудитель – очень маленькая спирохета Borrelia burgdorferi, единственная из всех боррелий патогенная для человека. Хозяевами являются многие позвоночные животные: собаки, овцы, птицы, коровы и лошади, но основной хозяин и переносчик – иксодовые клещи, у которых инфекция длится на протяжении всей жизни клеща. В России – это I.ricinus и I.persulcatus. Заболевание характерно для весенне-летнего периода. Чаще наблюдается в Московской, Ленинградской, Тверской и других, преимущественно северных областях, а также в Прибалтике.

Заболевание системное, имеющее 3 стадии:

• I стадия возникает через одну неделю после укуса клеща и длится от 3 до 33 дней. Для неё характерна лихорадка и мигрирующая эритема. Если терапию начинают в этой стадии, то дальнейшее развитие заболевание удаётся предотвратить.
• Через 4 недели после укуса развивается II стадия. Для неё характерны поражение сердца и неврологическая «триада»: асептический менингит, паралич лицевого нерва и периферические невропатии.
• Через 6 недель, а иногда через несколько лет у нелеченных больных развиваются тяжёлые поражения суставов.

Лабораторная диагностика. При классической картине мигрирующей эритемы диагноз ставится по клиническим признакам, в остальных случаях его подтверждают лабораторными методами. Посев, выявление антигена возбудителя и гистологическое исследование кожи недостаточно чувствительны и специфичны, гистологическое исследование, кроме того, инвазивно. Поэтому диагноз подтверждают, в основном, серологическими методами – выявлением в крови специфических IgG и IgM антител к возбудителю (в лаборатории ИНВИТРО, соответственно, тесты № 243 и 244).

ПЦР-тестирование на наличие генетического материала возбудителя в данном случае малоэффективно, но используется при необходимости у пациентов с отрицательными результатами серологических тестов, но вескими клиническими подозрениями на инфицирование, а также у пациентов с иммунодефицитом.

Специфические антитела к Borrelia burgdorferi начинают обнаруживаться на 2-4 неделе после начала инфекции (сначала IgM, потом IgG), максимальное количество IgG синтезируется через 1,5 – 3 месяца после инфицирования. Антитела к Borrelia burgdorferi часто не выявляются на ранней, локализованной стадии заболевания или при рано назначенной антимикробной терапии. Таким образом, отрицательный результат серологических тестов на ранних стадиях инфекции не является подтверждением её отсутствия и требует перепроверки в динамике через 2 – 4 недели. На диссеминированной и хронической стадиях специфические антитела к возбудителю имеются практически всегда.

Антитела класса IgG циркулируют в крови длительный срок (от нескольких месяцев до нескольких лет), даже после успешной антимикробной терапии и излечения инфекции. Поэтому по присутствию и титру антител об успехе лечения судить нельзя. Иммунитет против Borrelia burgdorferi не является стерильным. У переболевших людей возможно повторное заражение через несколько лет. Выявление антител к Borrelia burgdorferi не всегда сопровождается клиническими признаками болезни Лайма.

По оценкам, специфичность ИФА тестирования антител к Borrelia burgdorferi в настоящее время достигает 95% (т. е. неспецифические реакции, перекрёстное реагирование с антигенами других бактерий могут примерно в 5% случаев давать ложноположительные результаты). В сомнительных случаях для подтверждения результатов ИФА-тестов используют иммуноблот.

Патогенез

Боррелии, попав в кожу человека через укус клеща из очага первичного заражения быстро мигрируют по кровотоку, оседая во множестве очагов. Для трансмиссии боррелий от момента присасывания клеща к человеку требуется около 36 часов, что обусловлено тем, что возбудитель в норме находится в кишечнике клеща и для миграции возбудителя в слюнные железы переносчика и передачи человеку необходимо, как минимум, сутки после начала кровососания.

Однако, в ряде случаев, боррелии могут содержаться в слюнных железах клеща и в таких случаях возможна трансмиссия возбудителя на протяжении нескольких часов после присасывания. Период диссеминации возбудителя по организму от момента заражения варьирует от трех дней до 2-3 недель. Клинические синдромы инициируются персистирующим возбудителем в различных тканях организма, его антигенами и обусловлены совокупностью иммунопатологических воспалительных реакций. Характерной особенностью является формирование лимфоплазматических инфильтратов в лимфатических узлах, коже, подкожной клетчатке, мозге, селезенке, периферических ганглиях.

После проникновения боррелий в кожу (на ранней стадии заболевания) начинается выработка специфических антител и пролиферация специфических Т-клеток, которые обусловливают клеточный иммунный ответ. Оба вида иммунного ответа в начальной стадии заболевания выражены крайне слабо. В последующем отмечается нарастание титров специфических антител и пролиферация Т-клеток, а в последующем формируется специфический IgM-ответ, обусловленный поликлональной активацией B-клеток, что способствует повышению уровня общего сывороточного IgM и появлению антинуклеарных антител и циркулирующих иммунных комплексов. Клеточный иммунный ответ максимально выражен на поздних стадиях заболевания.

Патогенез на более поздних стадиях болезни опосредован отложением в сосудах и тканях комплексов антиген-антитело, инфильтрацией нейтрофилами и медиаторами клеточного иммунитета (интерлейкин) пораженных тканей. Боррелии также могут служить пусковым фактором аутоиммунных реакций, поддерживающих воспалительный процесс даже уже в отсутствии в организме возбудителя. Гистопатогенез представлен наличием в организме периваскулярных инфильтратов, состоящих из макрофагов, плазмоцитов и лимфоцитов, а также инфильтрацией этими элементами всех поврежденных тканей.

Соответственно, в патогенезе боррелиозной инфекции выделяют несколько стадий:

• Стадия локального инфицирования с развитием в месте внедрения возбудителя патологического процесса.
• Стадия диссеминации боррелий по организму от места первичного внедрения возбудителя.
• Стадия органных/тканевых поражений, обусловленных формированием патологических аутоиммунных изменений.

Боррелиоз у детей

Несмотря на то, что симптомы клещевого боррелиоза у детей аналогичны клиническим проявлениям болезни Лайма у взрослых, следует отметить отличительную особенность клещевого боррелиоза у детей: более частые сочетаемые поражения нервной системы.

При этом, на фоне различных неврологических нарушений интенсивно проявляется менингиальный симптомокомплекс. У детей часто поражаются лицевой и тройничный нерв, что проявляется болями в триггерных зонах или глазной орбите, парезом мышц лица, болезненностью в заушной области. Лечение детей проводится аналогично лечению взрослых пациентов с учетом возрастных дозировок антибиотиков и наличия противопоказаний. После выздоровления у детей могут длительно оставаться астено-вегетативные реакции, в виде гипервозбудимости, эмоциональной лабильности, нарушения сна.

Вестерн-Блот технология

Данная технология является наиболее современной и точной в диагностике боррелий. В его основе лежит аналитический подход в определении в исследуемых материалах наличия специфичных белковых молекул и протеинов.

Процедура начинается с разделения исследуемого материала на белковые фракции с помощью электрофореза (прохождение электрического тока через материал). Данный способ основан на различной молекулярной массе белковых образований.

После этого происходит перенос разделенных белков на специальные мембраны. Затем они обрабатываются комплексом из антител, которые обладают специфичностью к определенным белкам.

Данный метод имеет много общего с ранее упомянутыми способами диагностики и, по сути, является их квинтэссенцией. Способ позволяет со стопроцентной достоверностью отличить энцефалит от боррелиоза и любых других инфекционных патологий.

Блоттинг отличается от серологических реакций и такого средства, как иммуночип, точным определением специфических и неспецифических антител, а не просто их наличие или отсутствие. Высоко специфичность данного метода позволяет ему разделить лидирующую позицию среди остальных методов с ПЦР.

К сожалению, даже такой современный метод способен давать ложно отрицательные результаты для пациентов с иммунодефицитными состояниями. Данная неточность связана с полным отсутствием иммунного ответа от организма пациента.

Патогенез

Боррелии, попав в кожу человека через укус клеща из очага первичного заражения быстро мигрируют по кровотоку, оседая во множестве очагов. Для трансмиссии боррелий от момента присасывания клеща к человеку требуется около 36 часов, что обусловлено тем, что возбудитель в норме находится в кишечнике клеща и для миграции возбудителя в слюнные железы переносчика и передачи человеку необходимо, как минимум, сутки после начала кровососания.

Однако, в ряде случаев, боррелии могут содержаться в слюнных железах клеща и в таких случаях возможна трансмиссия возбудителя на протяжении нескольких часов после присасывания. Период диссеминации возбудителя по организму от момента заражения варьирует от трех дней до 2-3 недель. Клинические синдромы инициируются персистирующим возбудителем в различных тканях организма, его антигенами и обусловлены совокупностью иммунопатологических воспалительных реакций. Характерной особенностью является формирование лимфоплазматических инфильтратов в лимфатических узлах, коже, подкожной клетчатке, мозге, селезенке, периферических ганглиях.

После проникновения боррелий в кожу (на ранней стадии заболевания) начинается выработка специфических антител и пролиферация специфических Т-клеток, которые обусловливают клеточный иммунный ответ. Оба вида иммунного ответа в начальной стадии заболевания выражены крайне слабо. В последующем отмечается нарастание титров специфических антител и пролиферация Т-клеток, а в последующем формируется специфический IgM-ответ, обусловленный поликлональной активацией B-клеток, что способствует повышению уровня общего сывороточного IgM и появлению антинуклеарных антител и циркулирующих иммунных комплексов. Клеточный иммунный ответ максимально выражен на поздних стадиях заболевания.

Патогенез на более поздних стадиях болезни опосредован отложением в сосудах и тканях комплексов антиген-антитело, инфильтрацией нейтрофилами и медиаторами клеточного иммунитета (интерлейкин) пораженных тканей. Боррелии также могут служить пусковым фактором аутоиммунных реакций, поддерживающих воспалительный процесс даже уже в отсутствии в организме возбудителя. Гистопатогенез представлен наличием в организме периваскулярных инфильтратов, состоящих из макрофагов, плазмоцитов и лимфоцитов, а также инфильтрацией этими элементами всех поврежденных тканей.

Соответственно, в патогенезе боррелиозной инфекции выделяют несколько стадий:

• Стадия локального инфицирования с развитием в месте внедрения возбудителя патологического процесса.
• Стадия диссеминации боррелий по организму от места первичного внедрения возбудителя.
• Стадия органных/тканевых поражений, обусловленных формированием патологических аутоиммунных изменений.

Лечится ли энцефалит?

Вылечить энцефалит возможно, но для этого требуется большое количество лекарств и методов. В данном случае нет определённого вида лечения, приводящего к выздоровлению. Терапия проводится исключительно в стационаре с назначением патогенетических, этиотропных и симптоматических препаратов. Комплексно прописываются также лекарства, обладающие противовоспалительным, иммунологическим, противовирусным, гормональным, противосудорожным, нейропротекторным, психотропным и другими действиями. После этого назначают восстановительное лечение: это лечебная физкультура, психо- и трудотерапия, логопедия и т.п. В течение нескольких лет могут быть судороги, симптомы атрофии мышц, деградации когнитивной функции и прочие расстройства ЦНС. Порой последствия могут остаться на всю оставшуюся жизнь.

Процедура ИФА (иммуноферментного анализа)

Несмотря на то, что иммуноблот на боррелиоз позволяет получить более достоверную информацию, ИФА – экспресс метод, который показывает, как изменяется уровень IgM в сыворотке. Для этого анализа требуется сдать кровь на антитела после укуса, чтобы узнать собственные показатели.

Материалы для анализа на клещевой боррелиоз берется дважды, с промежутком между заборами в 21-28 дней после укуса. Помимо этого, титр (возрастание количества IgM) антител будет свидетельствовать об интенсивности инфекционного процесса.

Точность результата зависит от многих факторов. По этой причине необходимо придерживаться некоторых правил когда сдавать соответствующий анализ:

• Избегайте стрессовых и физических нагрузок незадолго до забора анализа;
• Не употребляйте алкоголь, жирную и острую пищу за 72 часа до сдачи анализа;
• Постарайтесь снизить количество используемых фармакологических препаратов;
• Недопустима сдача анализа после УЗИ, рентген диагностики и физиопроцедур;
• Постарайтесь не курить в день сдачи анализа;
• Анализ сдается на голодный желудок;

Как видите, правил действительно много

Важно придерживаться их, так как результат анализ баррелиоза может меняться из-за многих факторов. Клещевой боррелиоз должен быть правильно диагностирован, чтобы было назначено верное лечение

Помните, что неверный диагноз (например энцефалит) приведет к неверному диагнозу и потере времени.

Антитела к возбудителю боррелиоза IgG (болезнь Лайма) (в крови)

Ключевые слова: лайм БЛ клещевой боррелиоз иксодовый клещ иксодовый боррелиоз кровь

Антитела к возбудителю боррелиоза IgG в крови (Клещевой системный боррелиоз или болезнь Лайма) – показатель инфицированности спирохетой Borrelia burgdorferi после укуса клещом. Основные показания к применению: подтверждение диагноза болезни Лайма (боррелиоза), клиническая картина сходная с боррелиозом (лихорадка, эритематозная мигрирующая сыпь, симптомы асептического менингита, неврологические нарушения, артриты неясной этиологии и другие).

Болезнь Лайма (системный клещевой боррелиоз) – рецидивирующая трансмиссивная инфекция, вызванная спирохетой Borrelia burgdorferi. Заболевание протекает стадийно. К ранним проявлениям относятся: головная боль, жар, усталость, характерное кольцевидное покраснение на коже (мигрирующая эритема). Первая стадия после укуса клеща развивается через несколько дней (до месяца) и протекает с лихорадкой и эритематозной мигрирующей сыпью, встречающейся у 60-80 % больных. Вторая стадия начинается через 4 недели и проявляется в 10 -15% случаев неврологической и кардиологической симптоматикой (периферическая невропатия, асептический менингит, боли в сердце, сердцебиение). Третья стадия (поздний период) развивается через полгода (и до нескольких лет) с признаками артрита у 10% больных.

Боррелиоз или болезнь Лайма названа по географическому расположению местности (г. Лайм, штат Коннектикут, США) в котором в 1975 г. впервые обнаружили заболевание. Заболевание встречается в Северной Америке, Китае, Японии, Австралии, а также в странах Восточной Европы, России, Молдавии, Прибалтике. Переносчиком являются клещи. Возбудитель инфекции – спирохета Borrelia burgdorferi. Источником инфекции являются многие виды диких и домашних животных (включая грызунов и птиц). Инфицированный человек не является источником инфекции для другого человека. Механизм передачи возбудителя трансмиссивный – при укусе клеща. Основным переносчиком инфекции на европейской территории являются клещи Ixodes ricinus и Ixodes persulcarus. Эти клещи ( в зависимости от региона) могут быть и переносчиками другого заболевания – энцефалита клещевого дальневосточного (весенне-летний энцефалит), который вызывается РНК-содержащим вирусом из семейства Togaviridae Flavivirus. В США основным переносчиком спирохеты Borrelia burgdorferi является клещ Ixodes dammini. Инкубационный период занимает от 2-х до 32 дней. Начальный этап болезни, длящийся до 4-5 недель характеризуется лихорадкой, недомоганием и мышечными болями. На месте укуса клеща развивается, увеличивающаяся в размерах, эритема (в среднем через 7 дней).

Антитела класса IgМ выявляются в крови, как правило, через 2-4 недели и возвращаются к норме в течение 6 месяцев. В ряде случаев антитела IgМ выявляются в течение более продолжительного периода или в конце заболевания, что говорит о инфицированности и неэффективности лечения. Содержание антител класса IgG увеличивается в крови через 4-6 недель после появления эритемы. Повышенное содержание антител может оставаться в течение нескольких месяцев и лет. Разовое определение антител IgG не имеет существенного диагностического значения, так как может указывать на ранее перенесенную инфекцию. Диагностическое значение имеет определение парных сывороток взятых с интервалом 4-6 недель. Уменьшение содержания антител является показателем выздоровления. На втором этапе, длящимся от 2-й до 22-й недели возможно развитие неврологических симптомов – радикулоневриты, серозный менингит, невриты черепных нервов. Возможны осложнения со стороны сердечно-сосудистой системы, проявляющиеся миокардитом, перикардитом, нарушением предсердно-желудочковой проводимости. На поздних этапах, начиная с 6-й недели могут развиться суставные и кожные проявления болезни. Ложноположительные результаты (высокие значения) при определении антител класса IgG в ряде случаев могут быть получены при инфицировании человека сифилисом (антитела к спирохетам) и возвратному тифу.