Содержание
3 Как проводится анализ крови
Кровь у пациента на анализ берется натощак или через 7-8 часов после приема пищи. Нельзя брать пробы в следующих обстоятельствах: повышенная температура тела, после недавно перенесенной болезни инфекционного характера, во время месячных у женщин, за 12-15 дней до родов у беременных женщин, сразу после родов, в течение суток после приема алкоголя. Не следует брать анализ у новорожденных детей в первые 2 недели жизни.
Кровь для проведения исследований отбирается из локтевой вены в объеме порядка 9-10 мл с соблюдением всех антисептических правил. У младенцев кровь берется путем надреза пятки специальным скальпелем. На проведение реакции проба должна поступить в течение 2 суток после отбора крови и при условии хранения при температуре не выше 3-4ºС.
Из крови пациента приготавливается сыворотка в следующем порядке. Кровь выдерживается при температуре 37ºС в термостате в течение 18-28 минут, а образовавшийся кровяной сгусток отделяется и поступает на центрифугу, где обрабатывается на скорости порядка 1000 об/мин в течение 14-16 минут. После такой процедуры над сгустком появляется прозрачная кровяная сыворотка, которая и забирается для дальнейших исследований. Если в сыворотке обнаруживаются эритроциты, то проводится повторное центрифугирование для их отделения. Окончательно выделенная сыворотка проходит инактивацию при 55-57ºС в течение 28-35 минут. Таким образом удаляется натуральный комплемент и нормализуется состояние глобулинов. Полностью подготовленная кровь хранится в холодильнике не более 7 дней.
Определение реакции Вассермана кровяной сыворотки осуществляется в 3 пробирках: во все пробирки наливается сыворотка, разведенная раствором хлорида натрия в пропорции 1:5, а затем в первую пробирку вводится 0,25 мл трепонемного антигена, во вторую – 0,25 мл кардиолипина, а в третью (контрольную) – 0,25 мл раствора хлорида натрия. Затем во все пробы вводится такое же количество комплемента. Необходимо отметить, что смешивание компонентов заранее не производится.
Следующий этап – первичная инкубация в термостате при температуре 36-38ºС в течение 46-55 минут. После тепловой обработки вводится гемолитический состав (по 0,5 мл в каждую пробирку) с перемешиванием путем встряхивания. Далее осуществляется окончательная инкубация в аналогичных условиях до полного завершения операции гемолиза. Внимательно оценивается наличие или отсутствие гемолиза. Оценку результатов реакции проводят путем сравнения с контрольными образцами. Для этой цели используется 2 дополнительные пробирки: в одну помещается кровь, в которой достоверно установлен возбудитель сифилиса, а в другую – кровь абсолютно здорового человека.
Расшифровка
В бланке результатов ставятся плюсы или минусы. Последние говорят об отрицательной реакции и отсутствии болезни. Положительная реакция может быть описана знаками от одного до четырех плюсов. Расшифровка показывает стадию болезни:
- ++++ или +++ – положительная проба;
- ++ – слабоположительная;
- + – сомнительная, требует перепроверки.
Если анализ RW показал минус, это не исключает, что сифилис у человека на первой или третьей стадии. Плюс отрицательная реакция может говорить о разрушении эритроцитов крови. Вторичный период сифилиса не всегда показывает положительный результат. В первые 17 дней реакция может быть отрицательной, и только к шестой неделе может показать ++++, да и то только у 25% больных сифилисом. После этого достоверность приближается к 80%. Примерно 5% здоровых людей показывают ложноположительный результат.
Анализ на РВ положительный
Если полученный анализ на РВ положителен, это говорит о наличии в крови антител к бледным трепонемам – то есть прошло около 1,5 месяцев с момента заражения. Другими причинами появления ++++ в бланке результатов являются:
- проведение противосифилитических лечебных мероприятий – снижение острого процесса;
- беременность при отсутствии самой болезни – расшифровка анализа будет слабоположительной примерно у 1,5% женщин;
- первичный сифилис – 80% случаев на 6-8 неделе;
- вторичный сифилис в 100% случаев;
- клинический рецидив болезни;
- третичный период заболевания – в 75% случаев;
- ранний врожденный сифилис.
RW отрицательный
При получении отрицательного результата анализа можно говорить об отсутствии в организме инфекции и антител к сифилису, но это не всегда так. На ранних стадиях заболевания результаты будут отрицательными, потому что антитела просто не успеют выработаться. Плюс на сбой достоверности влияют некоторые болезни, индивидуальные особенности пациентов.
Расшифровка
Исследование крови по Вассерману должен расшифровывать только квалифицированный врач. Результаты могут указывать не только на отрицательную или положительную реакцию, но и на промежуточную. Только специалист сможет правильно интерпретировать данные и не пугать раньше времени пациента. Типичный отрицательный результат обозначается знаком «-» и говорит о несомненном отсутствии сифилиса в организме человека.
Положительная реакция
При оценке концентрации антител положительное проявление может отмечаться одним, двумя, тремя или четырьмя плюсами. В расшифровке могут встречаться следующие обозначения:
- «+» и «++» — результат указывает на сомнительную, слабоположительную микрореакцию. Необходимо провести дополнительные диагностические анализы и обследование. Можно через некоторое время повторить анализ Августа Вассермана, потому что полной уверенности в отсутствии или наличии сифилиса нет. Причиной такого результата может стать нарушение подготовительных процедур перед сдачей крови.
- «+++» — положительная реакция. Дополнительного или повторного подтверждения не требуется, у пациента есть сифилис и должен пройти полное обследование. Женщинам назначают мазок из влагалища или матки, мужчины сдают материал из уретры. Такой результат редко бывает ошибочным, но могут назначить уточняющие анализы, если симптомы больного схожи на другие заболевания.
- «++++» — окончательный положительный результат. Высокая интенсивность реакции.
- «++++» — окончательная положительная реакция. Полученный результат достоверный на 100% и не требует никаких дополнительных анализов. Диагноз – сифилис.
Ложноположительная реакции Вассермана
Такой ответ может получить абсолютно здоровый человек, происходит это по конкретным причинам. Происходит такая реакция, если у пациента есть острые или хронические стадии заболевания, недавно сделанные прививки или были недавно получены физические травмы. Все эти состояния приводят к активной выработки неспецифического белка в организме, который называют антителами или иммуноглобулином. Анализ RW направлен на выявления эти белков и распознает как сифилитические. Это и становится основой для получения ложноположительного результата.
Причины
Выше было описано, почему при проведении теста на сифилис пациент может получить ложно положительный результат. Вот перечень состояний, который могут к этому привести:
- инфаркт миокарда;
- алкогольное, пищевое отравление;
- острые, хронические патологии печении, гепатит Д, С, В;
- травмы мягких тканей или костей;
- возрастные изменения в работе организма больного;
- туберкулез;
- болезни аутоиммунного характера.
Анализ крови на реакцию Вассермана (RW)
Реакция Вассермана (RW) — метод, позволяющий диагностировать сифилис у пациента. Методика этого лабораторного анализа была разработана еще вначале XX века и используется по сей день. На данный момент существуют различные модификации теста, но в основе лежит главный принцип, предложенный ученым Вассерманом.
В центре «МедПросвет» можно быстро, качественно и достоверно пройти соответствующее обследование. При необходимости врачи клиники составят индивидуальную программу лечения диагностированной патологии.
Что это за анализ крови на реакцию Вассермана (RW)?
Реакция Вассермана в своем первозданном виде сравнительно редко используется в реальной клинической практике, что обусловлено наличием более точных современных вариаций этого обследования.
Однако пациенты могут легко заметить, что во всех бланках по-прежнему фигурирует термин «RW». Такое название остается в качестве своеобразной дани традиции.
На самом деле в практике используются уже более усовершенствованные и высокоточные методики по типу РМП, RPR и тому подобное.
Что показывает реакция Вассермана? Суть данного лабораторного теста заключается в возможности определения в крови пациента специфических белков (антител) к возбудителю заболевания — бледной трепонеме (Treponema pallidum).
Как проверяют оригинальную реакцию Вассермана?В исследуемый образец биологической жидкости добавляется искусственно синтезированный аналог возбудителя, который добывается из тканей бычьего сердца. Предполагается, что если в крови больного присутствует антитела к трепонеме (иммуноглобулины, которые вырабатываются в организме для борьбы с инфекцией), тогда они формируют осадок.
Реакция Вассермана — скрининговый тест. Благодаря низкой стоимости и простоте выполнения он может применяться для массового обследования населения. Но для установления окончательного результата показаны более специфичные исследования.
Показания
Показания к проведению скринингового обследования:
- подготовка к оперативным вмешательствам;
- планирование беременности;
- донорство;
- интимные связи в отсутствие постоянного партнера;
- возникновение изъязвлений на коже и слизистых, высыпания и зуд;
- ненормальные выделения из наружных отделов половых органов;
- увеличение лимфатических узлов, в первую очередь паховых;
- боли в костях, суставах.
Сдача крови на реакцию Вассермана — простой и надежный способ выявления потенциальной причины указанных выше симптомов.
Подготовка и проведение
Биологическим материалом для идентификации бледной трепонемы является венозная кровь человека.
Как сдавать реакцию Вассермана — натощак или нет? В некоторых рекомендациях можно увидеть, что для получения максимально точного результата требуется временно ограничить употребление пищи, особенно жирной.
Сколько делается по времени реакция Вассермана (срок выполнения анализа на RW)? В нашем медицинском центре готовность анализа составляет до 2 суток.
Расшифровка результатов реакции Вассермана RW
Расшифровка анализа крови на RW проводится врачом-лаборантом после изучения содержимого пробирок с кровью, в которую добавляли аналог трепонемы. При наличии осадка речь идет о положительной реакции, его отсутствие — негативная проба, незначительное количество помутнения — сомнительный тест.
Положительная реакция Вассермана, как правило, говорит о наличии болезни. Однако антитела могут оставаться в организме пациента еще в течение 12 месяцев после выздоровления. Отрицательный результат указывает на отсутствие проблемы, ее раннее начало или поздние стадии течения.
При каких заболеваниях реакция Вассермана положительная? В первую очередь исследование направлено на верификацию диагноза «сифилис».
Однако в некоторых случаях реакция Вассермана будет положительной и у неинфицированного человека, например, ложноположительные результаты встречаются при беременности, туберкулезе и других заболеваниях.
Для верификации состояния пациента иногда могут понадобиться уточняющие тесты.
Где сдать анализ крови на реакцию Вассермана (RW) в СПб?
Быстро и качественно сделать анализы в СПб можно в клинике «МедПросвет». Цена на реакцию Вассермана (анализ на RW) указана в прейскуранте на сайте клиники. Дополнительную информацию можно уточнить у администраторов центра по контактным телефонам.
Сдать анализы крови можно без предварительной записи ежедневно:
- пн.-сб.: 08:30—13:00 (первый забор), 13:00—17:00 (второй забор)
- вс.: 09:30—14:00.
Для получения результатов анализов по электронной почте необходимо оставить письменное согласие на отправку у администраторов медицинского центра.
Прямые методы. Дань традиции RW продолжается (трепонемные тесты)
Имеют название «RW» и тесты трепонемного происхождения которые уже очень далеко ушли от реакции Вассермана. Для их производства используется сложное лабораторное оборудование (некоторые выполняются вообще автоматически – иммуноблоттинг, ИХЛ, ИФА). В качестве антигена могут выступать: тканевая, несущая патогенность Treponema pallidum, которая располагается на предметном стекле или в лунке иммуноферментной системы (туда же помещается сыворотка крови пациента), рекомбинантные протеины, выделенные с помощью генной инженерии, пептиды, синтезированные химическим путем. Однако не все, известные в мире, ТТ, используются у нас. Предпочитаемыми на территории Российской Федерации считаются отдельные трепонемные тесты.
РИФ (реакция иммунофлюоресценции) – трепонемный тест, основанный на обнаружении флюоресцирующих АТ в микроскопическом препарате. Если сыворотка содержит АТ, направленные против возбудителя сифилиса, то они начинают иммунологическое взаимодействие с антигенами (самими бактериями). Комплекс Treponema + АТ (иммуноглобулины классов M и G) находят, используя антивидовую флюоресцирующую сыворотку («противочеловеческую»), с помощью люминисцентной микроскопии.
РИБТ (реакция иммобилизации бледных трепонем) – самый специфичный анализ из всех, называемых RW и выявляющих данное венерическое заболевание. Методу уже 70 лет (Р. Нельсон, М. Мейер, 1949 год), однако он до сих пор не утратил своей актуальности. Но есть проблемы – широкому применению методики всегда препятствовали: дороговизна и сложность выполнения. Суть РИБК состоит в поиске иммобилизинов – АТ , которые в присутствии компонентов комплемента лишают спирохеты способности к подвижности.
Роль антигена в РИБК берут на себя живые патогенные бактерии, выделенные из крови кроликов, которым целенаправленно водили возбудитель, чтобы заразить животное.
Подсчитывают неподвижные формы Treponema pallidum под микроскопом:
- Наличие 50 – 100% иммобилизированных спирохет – результат положительный;
- Слабоположительной считают реакцию, если в препарате обнаруживается от 31 до 50% неподвижных бактерий;
- Доля неподвижных микроорганизмов, составляющая от 21 до 31%, принимается за сомнительный результат;
- Отрицательным считается тест, если процентное содержание иммобилизированных форм не превышает 20%.
О результатах (в плюсах: от 1+ до 4+) судят по оценке свечения микроорганизмов.
Если же испытуемая сыворотка лишена противотрепонемных АТ, то возбудитель никак себя не проявляет, и результат будет считаться отрицательным.
РИФ в своем проявлении при Lues опережает RW. Положительный результат можно заметить у большинства пациентов (до 80%), когда болезнь еще находится в серонегативном периоде. Латентный, вторичный, поздний, а также врожденный сифилис дает положительный ответ практически у всех больных.
РПГА (ракция пассивной гемагглютинации). В основе этой реакции лежит феномен агглютинации (склеивания и выпадения в осадок) эритроцитов, которые адсорбировали на своей поверхности возбудитель сифилиса. Склеивать такие эритроциты может сыворотка человека, в организме которого не только идет инфекционный процесс, вызванный бледной спирохетой, но уже и антитела (иммуноглобулины классов M и G – IgM, IgG), ассоциированные с сифилитической инфекцией образовались (они появляются ≈ через 14 дней, но иногда время может удлиняться до 1,5 месяцев). РПГА довольно специфична (96 – 100%), хотя чувствительность на ранней стадии болезни не столь высока (≈ 85%), зато в случаях вторичного, третичного и скрытого Lues она поднимается до 99 – 100%.
ИФА (суммарное определение специфических АТ – IgM + IgG) – иммуноферментный анализ. Его считают сверхчувствительным методом, выявляющим инфекционный процесс, как на самой ранней стадии, так и в остальных периодах.
Иммуноблоттинг (выявление IgM) – надежный, достоверный, высокочувствительный и специфичный тест, применяемый для диагностики сифилитической инфекции. Иммуноблоттинг – подтверждающий Lues анализ.
ИХЛ (иммунохемилюминесценцентный метод) – автоматизированный, обладающий достаточной чувствительностью (99%) и высокой специфичностью, современный подтверждающий и участвующий в скрининге трепонемный тест.
Примечания[править | править код]
- ↑ М. Милич, «Эволюция сифилиса»
- ↑ Ю. К. Скрипкин «Кожные и венерические болезни», учебник для студентов лечебного факультета
- ↑ Флек, Людвик. Возникновение и развитие научного факта: введение в теорию стиля мышления и мыслительного коллектива. — Москва: Идея-Пресс, Дом интеллектуальной книги., 1999. — С. 220. с. — ISBN 5-7333-0018-3.
- ↑ Ludwik Fleck. Entstehung und Entwicklung einer wissenschaftlichen Tatsache. Einführung in die Lehre vom Denkstil und Denkkollektiv. — Basel: Schwabe und Co., Verlagsbuchhandlung, 1935.
- ↑ YouTube — Реакция Вассермана-1. Ливийский пример заразителен
Расшифровка результатов анализа
При первичном сифилисе реакция Вассермана становится положительной на 6-8 неделе течения заболевания (в 90 % случаев), при этом отмечается следующая динамика:
- в первые 15-17 дней после заражения реакция у большинства больных, как правило, отрицательная;
- на 5-6-й неделе заболевания примерно у 1/4 части больных реакция становится положительной;
- на 7-8-й неделе заболевания RW становится положительной у большинства.
При вторичном сифилисе RW положительна всегда. Вместе с другими серологическими реакциями (РПГА, ИФА, РИФ) позволяет не только выявить наличие возбудителя, но и выяснить приблизительный срок заражения.
При развитии сифилитической инфекции на 4-й неделе заболевания, после возникновения первичной сифиломы, реакция Вассермана переходит из отрицательной в положительную, оставаясь таковой и во вторичном свежем, и во вторичном рецидивном периоде сифилиса. В скрытом вторичном периоде и без лечения RW может переходить в отрицательную с тем, чтобы при наступлении клинического рецидива сифилиса вновь стать положительной. Поэтому, в скрытом периоде сифилиса отрицательная реакция Вассермана не свидетельствует о его отсутствии либо излеченности, а лишь служит благоприятным прогностическим симптомом.
При активных поражениях третичного периода сифилиса положительная RW встречается приблизительно в 3/4 случаев заболевания. Когда же активные проявления третичного периода сифилиса исчезают, она часто переходит в отрицательную. В этом случае отрицательная реакция Вассермана у больных не свидетельствует о том, что у них нет сифилитической инфекции.
При раннем врожденном сифилисе RW практически во всех случаях положительна и является ценным методом для верификации болезни. При позднем врожденном сифилисе результаты ее соответствуют таковым, полученным в третичном периоде приобретенного сифилиса.
Большое практическое значение имеет исследование реакции Вассермана в крови у больных сифилисом, подвергающихся лечению. У некоторых больных, несмотря на энергичную противосифилитическую терапию, реакция Вассермана не переходит в отрицательную — это так называемый серорезистентиый сифилис. В данном случае проводить бесконечно противосифилитическую терапию, добиваясь перехода положительной RW в отрицательную, не имеет смысла.
Из изложенного выше следует, что отрицательная реакция Вассермана, не всегда является признаком отсутствия сифилитической инфекции в организме.
Возможна положительная реакция Вассермана у людей при ряде других, не связанных с сифилисом заболеваниях и состояниях: туберкулёзе, системной красной волчанке, заболеваниях крови (лейкемиях), проказе, пемфигусе, лептоспирозе, злокачественных новообразованиях, тифах, скарлатине, болезни бери-бери, сонной болезни, во время беременности, перед родами или после них, менструации, после наркоза, после употребления спиртных напитков, у лиц, злоупотребляющих наркотиками, приёма жирной пищи, лекарств, введения чужеродных сывороток. В таких случаях для уточнения диагноза используются другие методы (РПГА, ИФА, РИФ). Очень характерна неспецифическая положительная реакция Вассермана при малярии, особенно в приступный период. Поэтому если RW положительна у человека без клинических проявлений сифилиса и отрицающего у себя сифилитическую инфекцию, следует подумать о малярии.
Всё перечисленное свидетельствует о том, что положительный результат реакции Вассермана, еще не является безусловным доказательством наличия сифилитической инфекции.
Восстановление после сдачи анализа
После сдачи анализа крови врачи рекомендуют правильное и сбалансированное питание, а также как можно больше жидкости. Можно позволить себе теплый чай и шоколад. Будет полезным воздержаться от физических нагрузок и ни в коем случае не принимать алкоголь.