Анализ крови на реакцию вассермана

Показания для нетрепонемного тестирования на сифилис

Анализ крови на микрореакцию – это стандартная процедура, для отсеивания здоровых людей из общего количества обследованных, применяемая повсеместно: как при оформлении медицинских книжек для работы/учёбы, так и при постановке на учёт в женскую консультацию.

Показания для исследования реакции микропреципитации:

1. Оперативный скрининг больших групп населения на сифилис:
   • доноров крови, костного мозга и органов для трансплантации;
   • представителей определённых профессий (военнослужащих, работников сферы общественного питания, образования, здравоохранения);
   • беременных женщин и пациенток, готовящихся к процедуре искусственного оплодотворения (ЭКО);
   • осуждённых, наказание которых сопряжено с отбыванием реального тюремного срока;
   • больных, которым предстоят плановые хирургические операции;
   • лиц, проходящих лечение в стационаре (это обязательный анализ в России и странах СНГ).
2. Диагностика пациентов с подозрением на сифилис:
   • детей, появившихся на свет от матерей с подтверждённым диагнозом;
   • больных с иными венерическими заболеваниями;
   • людей, имевших незащищённую половую связь с непроверенным партнёром;
   • лиц с явными клиническими признаками наличия сифилитической инфекции (генитальными язвами, сыпью на теле и увеличенными лимфатическими узлами);
   • людей, совместно проживающих с заражёнными родственниками (или соседями) при условии существования между ними очень тесного бытового контакта (общее использование предметов гигиены, бритвенных принадлежностей и т.д.).
3. Контроль лечения сифилиса – после окончания назначенного курса этиотропной терапии специфические тесты, реагирующие на сам возбудитель, ещё долго показывают положительный результат, основанный на остаточных явлениях инфекции, поэтому критерием выздоровления можно считать анализ крови на микрореакцию, которая к этому моменту, как правило, негативируется.

Эффективность выбранной схемы лечения подтверждается снижением титров в 4 и более раз за год.

В этот период используется количественная оценка микрореакции преципитации. Если показатели титров стабильны или увеличиваются, то это говорит о необходимости смены терапевтического курса.

Что это такое

Далеко не все знают о тесте Вассермана. Реакция RW основана на иммунологическом ответе организма при наличии в крови возбудителя сифилиса. Она происходит по принципу связывания комплемента. Что это за анализ: в сыворотке крови у человека, зараженного сифилисом, образуются соответствующие антигены, которые вместе объединяются в комплекс и становятся своеобразным индикатором патологического состояния.

Так выглядит возбудитель сифилиса

При образовании связки происходит задержка гемолиза, то есть наблюдается RW крови. Что это значит? В исследуемой сыворотке образуется осадок эритроцитарной массы. Чем больше задержка, тем тяжелее состояние больного.

Техника проведения

Чтобы получить максимально достоверные результаты, сдавать кровь на RW можно только человеку, который ближайшие две недели не болел простудными заболеваниями и не делал профилактические прививки

Кроме того, очень важно, производится забор натощак или нет. Употребление пищи на протяжении 6 часов до сдачи анализов способно исказить итоговый результат, особенно если имели место алкоголь, сладости и жирные продукты

Из вены, откуда берут необходимый для исследования материал, требуется забрать стандартную порцию крови.

Исследование крови пациента проводится в несколько этапов. Для проведения работы необходимо иметь в распоряжении такие компоненты:

• сыворотка пациента;
• гемолитическая сыворотка;
• комплемент;
• антиген — кардиолипин из бычьего сердца;
• эритроциты барана.

Для проведения анализа необходимо несколько компонентов

Все составляющие компоненты смешиваются в равных пропорциях. Сыворотку заранее прогревают на водяной бане, чтобы добиться стабилизации глобулинов. Реакция проводится в несколько фаз:

• 1 — сыворотка пациента, антиген, комплементарное вещество смешиваются и помещаются в термостат, поддерживающий температуру в 37 градусов, на 45-60 минут.
• 2 — вводится гемолитическая смесь, то есть эритроцитарная масса и дополнительная сыворотка.
• 3 — по истечении еще одного часа, проведенного в термостате, наступает гемолиз. На этом этапе антиген и исследуемую сыворотку заменяют физиологическим раствором.

Даже если симптомы сифилиса никак себя не проявляли, реакция Вассермана поможет установить вероятность наличия этого заболевания.

Гепатит C является опаснейшим заболеванием. Для его раннего выявления необходимо сдать анализы, которые укажут на наличие или отсутствие инфекции в организме. Рассмотрим применяемые современной медициной методики и их расшифровку.

Методические требования к постановке основного опыта

Ввиду того, что результаты реакции учитываются по отсутствию или наличию гемолиза после прибавления гемолитической системы, основным методическим требованием RW является применение точно оттитрованной дозы комплемента с таким расчетом, чтобы в случае адсорбции комплемента при взаимодействии испытуемой сыворотки с антигеном не остался излишек комплемента в количестве, достаточном для растворения эритроцитов, сенсибилизированных гемолитической сывороткой; с другой стороны, доза комплемента не должна быть слишком мала, чтобы обеспечить гемолиз эритроцитов в случае отсутствия реакции между исследуемой сывороткой и антигеном. Поэтому перед постановкой основного опыта минимальная доза комплемента, вызывающая гемолиз при добавлении гемолитической системы, оттитровывается в присутствии антигена и нормальной сыворотки. В основном опыте комплемент применяется с нек-рой надбавкой (не менее 15—30%). Каждый из 5 ингредиентов реакции (испытуемая сыворотка, антиген, комплемент, взвесь бараньих эритроцитов и гемолитическая сыворотка) применяется в одинаковом объеме (напр., по 0,25 мл). Для обеспечения оптимальных условий фиксации комплемента на образующемся комплексе в случае взаимодействия исследуемой сыворотки с антигеном смесь сыворотки, антигена и комплемента выдерживают в термостате в течение 45—60 мин. (1-я фаза реакции), после чего добавляют гемолитическую систему и пробирки вновь помещают в термостат (2-я фаза).

Одновременно ставят 3 контрольных опыта, в одном из которых антиген заменяется изотоническим раствором хлорида натрия, а в другом исключается исследуемая сыворотка, в третьем исследуется заведомо положительная по RW сыворотка. Учет реакции производится при наступлении гемолиза в контрольных пробирках основного опыта.

Расшифровка

В настоящие время расшифровка анализа крови на RW, результатов плюсами не всегда означает, что пациент заражен сифилисом. Такая реакция в наше время практически не проводится, так как она не является специфичной.

Вирус, попавший в организм беременной женщины вызывает очень тяжелые последствия, он способен оказать влияние на плод, спровоцировав развитие уродства плода и других серьезных пороков. В таких ситуациях специалисты назначают терапию в виде необходимых медикаментов. Роды в таких случаях проводятся с помощью кесарево.

Сегодня известны следующие вирусы, которые можно обнаружить при исследовании крови человека:

• Реакция Вассермана.
• ВИЧ (СПИД).
• Вирусы гепатита С и В.

Такой компонент как трепонема бледная способна разрушить ткани и внутренние органы младенца. Сильнейшее действие она оказывает на нервную систему, а также на кости и мышцы. Такое заболевание способно вызвать ранние роды, с дальнейшей смертью ребенка. В некоторых случаях возможно позднее развитие сифилиса у детей, как правило, он проявляется в 15-16 лет. Инфекция проявляется в отклонении развития костно-мышечной ткани. Если сифилис обнаружили у беременной девушки, ей срочно необходимо пройти курс терапии специальными лекарственными препаратами.

ВИЧ (СПИД) – отсутствие лечения такого заболевания, способно полностью разрушить иммунную систему человека. Вследствие чего больной погибает от различных инфекций и опухолей, которые развиваются на фоне отсутствия иммунитета. При исследовании беременной женщины, возможно обнаружение антител к вирусу СПИД. В такой ситуации ей необходимо сразу же выполнить более детальное обследование для исключения и или выявления состояния иммунного вируса. При наличии такой инфекции, существует большая вероятность родить здорового ребенка.

Вирусы гепатита В и С – представляют тоже серьезную опасность для человеческого организма. Гепатит не имеет свойства проникать в ткани плаценты и не оказывают влияние на плод, но при наличии инфекции и беременности, он способен приобретать более тяжелый характер, что может сказаться на жизни женщины. Если в анализе крови выявлен гепатит, необходимо сразу начинать лечение гепатита препаратами, но в большинстве случаев, терапия начинается только после родов, так как лекарственные средства имеют сильнейшую токсичность.

Выполнение исследование крови на реакцию Вассермана способна дать ложноположительный результат при следующих заболеваниях:

• Туберкулез.
• Воспалительные процессы в легких.
• Использование вакцин от различных инфекциях.
• Менструальные выделения во время беременности.
• При вирусном гепатите.
• У новорожденных в течении 8-10 дней жизни.
• При опухолях различного характера.

Анализ на RW может быть ложноположительным при опухолях различного характера

Что это такое, если реакция на RW отсутствует.

В этом случае можно судить о:

• Отсутствие заболевания.
• Ранняя стадия заболевания.

Выявление положительной реакции Вассермана при исследовании крови, означает что:

• Пациент заражен и может иметь любую форму заболевания.
• Возможна положительная реакция после лечения.
• Сопоставить возможность наличия другого заболевания способного дать положительный результат.

Многие пациенты не знают, как сдавать анализ крови на RW. Для того, чтобы пройти исследование на наличие сифилиса необходимо обратиться к лечащему врачу.

Прямые методы. Дань традиции RW продолжается (трепонемные тесты)

Имеют название «RW» и тесты трепонемного происхождения которые уже очень далеко ушли от реакции Вассермана. Для их производства используется сложное лабораторное оборудование (некоторые выполняются вообще автоматически – иммуноблоттинг, ИХЛ, ИФА). В качестве антигена могут выступать: тканевая, несущая патогенность Treponema pallidum, которая располагается на предметном стекле или в лунке иммуноферментной системы (туда же помещается сыворотка крови пациента), рекомбинантные протеины, выделенные с помощью генной инженерии, пептиды, синтезированные химическим путем. Однако не все, известные в мире, ТТ, используются у нас. Предпочитаемыми на территории Российской Федерации считаются отдельные трепонемные тесты.

РИФ (реакция иммунофлюоресценции) – трепонемный тест, основанный на обнаружении флюоресцирующих АТ в микроскопическом препарате. Если сыворотка содержит АТ, направленные против возбудителя сифилиса, то они начинают иммунологическое взаимодействие с антигенами (самими бактериями). Комплекс Treponema + АТ (иммуноглобулины классов M и G) находят, используя антивидовую флюоресцирующую сыворотку («противочеловеческую»), с помощью люминисцентной микроскопии.

РИБТ (реакция иммобилизации бледных трепонем) – самый специфичный анализ из всех, называемых RW и выявляющих данное венерическое заболевание. Методу уже 70 лет (Р. Нельсон, М. Мейер, 1949 год), однако он до сих пор не утратил своей актуальности. Но есть проблемы – широкому применению методики всегда препятствовали: дороговизна и сложность выполнения. Суть РИБК состоит в поиске иммобилизинов – АТ , которые в присутствии компонентов комплемента лишают спирохеты способности к подвижности.

Роль антигена в РИБК берут на себя живые патогенные бактерии, выделенные из крови кроликов, которым целенаправленно водили возбудитель, чтобы заразить животное.

Подсчитывают неподвижные формы Treponema pallidum под микроскопом:

• Наличие 50 – 100% иммобилизированных спирохет – результат положительный;
• Слабоположительной считают реакцию, если в препарате обнаруживается от 31 до 50% неподвижных бактерий;
• Доля неподвижных микроорганизмов, составляющая от 21 до 31%, принимается за сомнительный результат;
• Отрицательным считается тест, если процентное содержание иммобилизированных форм не превышает 20%.

О результатах (в плюсах: от 1+ до 4+) судят по оценке свечения микроорганизмов.

Если же испытуемая сыворотка лишена противотрепонемных АТ, то возбудитель никак себя не проявляет, и результат будет считаться отрицательным.

РИФ в своем проявлении при Lues опережает RW. Положительный результат можно заметить у большинства пациентов (до 80%), когда болезнь еще находится в серонегативном периоде. Латентный, вторичный, поздний, а также врожденный сифилис дает положительный ответ практически у всех больных.

РПГА (ракция пассивной гемагглютинации). В основе этой реакции лежит феномен агглютинации (склеивания и выпадения в осадок) эритроцитов, которые адсорбировали на своей поверхности возбудитель сифилиса. Склеивать такие эритроциты может сыворотка человека, в организме которого не только идет инфекционный процесс, вызванный бледной спирохетой, но уже и антитела (иммуноглобулины классов M и G – IgM, IgG), ассоциированные с сифилитической инфекцией образовались (они появляются ≈ через 14 дней, но иногда время может удлиняться до 1,5 месяцев). РПГА довольно специфична (96 – 100%), хотя чувствительность на ранней стадии болезни не столь высока (≈ 85%), зато в случаях вторичного, третичного и скрытого Lues она поднимается до 99 – 100%.

ИФА (суммарное определение специфических АТ – IgM + IgG) – иммуноферментный анализ. Его считают сверхчувствительным методом, выявляющим инфекционный процесс, как на самой ранней стадии, так и в остальных периодах.

Иммуноблоттинг (выявление IgM) – надежный, достоверный, высокочувствительный и специфичный тест, применяемый для диагностики сифилитической инфекции. Иммуноблоттинг – подтверждающий Lues анализ.

ИХЛ (иммунохемилюминесценцентный метод) – автоматизированный, обладающий достаточной чувствительностью (99%) и высокой специфичностью, современный  подтверждающий и участвующий в скрининге трепонемный тест.

Есть ли понижение

Нейтрофил – одна из разновидностей лейкоцитов. Главная его функция – уничтожение патогенной микрофлоры. Выделяют 2 вида клеток:

• Палочкоядерные. Молодые незрелые нейтрофилы, которые со временем приобретают полноценное ядро.
• Сегментоядерные. Считаются «воинами» иммунной системы и уничтожают опасные микроорганизмы. При острых инфекционных процессах нейтрофилы сегментоядерные всегда повышены у ребенка.

Нейтропенией принято считать снижение количества клеток ниже нижней границы нормы, а превышение верхней границы называется нейтроцитозом.

Результаты анализа крови RW

После того как осуществлен RW анализ крови, расшифровка результатов производится врачом, отправившим на обследование.

В заключении может быть указан один из следующих результатов:

• положительно;
• отрицательно.

Изучая RW анализ крови, что означает написанное заключение простому пациенту непонятно. Положительная реакция может иметь 4 стадии. В зависимости от ее выраженности в результате указывают:

• «++++» – гемолиз полностью отсутствует, организм имеет большое количество антител для борьбы с возбудителем сифилиса;
• «+++» – положительная реакция с длительной задержкой гемолиза;
• «++» – задержка гемолиза в отдельной его части;
• «+» – сомнительный результат, требует повторного обследования.

Об отрицательной реакции говорит полное отсутствие задержки гемолиза в исследуемом образце. В таком случае можно утверждать, что пациент здоров. Если подобный результат получается после проведенного курса лечения, спустя определенное время исследование повторяют для исключения рецидива заболевания.

Положительная реакция Вассермана

Полученный положительный результат в большинстве случаев свидетельствует о сифилисе.

Подобное явление наблюдается при различных формах болезни:

• первичный сифилис;
• вторичный сифилис;
• третичный серопозитивный сифилис.

Как утверждают специалисты, существует и ряд других патологий, при развитии которых результат будет положительным. В связи с этим, чтобы не впадать в панику после получения результата анализа, необходимо знать, при каких заболеваниях реакция Вассермана положительная.

Среди патологий:

• туберкулез;
• волчанка;
• малярия;
• вирусные инфекции;
• лептоспироз;
• пемфигус;
• новообразования различной локализации.

Ложноположительная реакция Вассермана

Антитела начинают вырабатываться в организме после попадания в него кардиолипина. Этот антиген не свойственен организму человека, однако при некоторых нарушениях и заболеваниях его появление становится возможным. В результате при отсутствии возбудителя сифилиса в организме обследуемого результат все равно будет положительным (ложноположительная реакция).

Как показывают врачебные наблюдения, ложноположительная реакция Вассермана, причины данного явления чаще связаны со следующими факторами:

• перенесенная пневмония;
• заболевания печени;
• болезни крови;
• период беременности;
• нарушение алгоритма лабораторного исследования.

Отрицательная реакция Вассермана

Об отрицательном результате говорят когда гемолиз происходит полностью, без задержек. Когда проводится экспресс-анализ крови на сифилис, в таком случае из-за отсутствия антител в образце крови пациента связывания с антигеном не происходит, комплекс не образуется. На основании микроскопии делается вывод. Кроме того, необходимо учитывать и время проведения теста. В первую неделю болезни реакция Вассермана будет отрицательной из-за недостаточной концентрации антител в крови.

Ложноотрицательный результат может наблюдаться у пациентов с сифилисом до 17-го дня с момента заражения. Как показывает статистика, и на 5-6-й неделе болезни только у 25% больных результат будет достоверным. Целесообразно проводить исследование не раньше, чем на 6-7-й неделе с момента предполагаемого заражения.

В связи с неспецифичностью реакции Вассермана в качестве альтернативы чаще используют экспресс метод диагностики сифилиса и следующие лабораторные исследования:

• РИФ;
• РПГА;
• ИФА.

Результаты анализа крови RW

После того как осуществлен RW анализ крови, расшифровка результатов производится врачом, отправившим на обследование.

В заключении может быть указан один из следующих результатов:

• положительно;
• отрицательно.

Изучая RW анализ крови, что означает написанное заключение простому пациенту непонятно. Положительная реакция может иметь 4 стадии. В зависимости от ее выраженности в результате указывают:

• «++++» – гемолиз полностью отсутствует, организм имеет большое количество антител для борьбы с возбудителем сифилиса;
• «+++» – положительная реакция с длительной задержкой гемолиза;
• «++» – задержка гемолиза в отдельной его части;
• «+» – сомнительный результат, требует повторного обследования.

Об отрицательной реакции говорит полное отсутствие задержки гемолиза в исследуемом образце. В таком случае можно утверждать, что пациент здоров. Если подобный результат получается после проведенного курса лечения, спустя определенное время исследование повторяют для исключения рецидива заболевания.

Положительная реакция Вассермана

Полученный положительный результат в большинстве случаев свидетельствует о сифилисе.

Подобное явление наблюдается при различных формах болезни:

• первичный сифилис;
• вторичный сифилис;
• третичный серопозитивный сифилис.

Как утверждают специалисты, существует и ряд других патологий, при развитии которых результат будет положительным. В связи с этим, чтобы не впадать в панику после получения результата анализа, необходимо знать, при каких заболеваниях реакция Вассермана положительная.

Среди патологий:

• туберкулез;
• волчанка;
• малярия;
• вирусные инфекции;
• лептоспироз;
• пемфигус;
• новообразования различной локализации.

Ложноположительная реакция Вассермана

Антитела начинают вырабатываться в организме после попадания в него кардиолипина. Этот антиген не свойственен организму человека, однако при некоторых нарушениях и заболеваниях его появление становится возможным. В результате при отсутствии возбудителя сифилиса в организме обследуемого результат все равно будет положительным (ложноположительная реакция).

Как показывают врачебные наблюдения, ложноположительная реакция Вассермана, причины данного явления чаще связаны со следующими факторами:

• перенесенная пневмония;
• заболевания печени;
• болезни крови;
• период беременности;
• нарушение алгоритма лабораторного исследования.

Отрицательная реакция Вассермана

Об отрицательном результате говорят когда гемолиз происходит полностью, без задержек. Когда проводится экспресс-анализ крови на сифилис, в таком случае из-за отсутствия антител в образце крови пациента связывания с антигеном не происходит, комплекс не образуется. На основании микроскопии делается вывод. Кроме того, необходимо учитывать и время проведения теста. В первую неделю болезни реакция Вассермана будет отрицательной из-за недостаточной концентрации антител в крови.

Ложноотрицательный результат может наблюдаться у пациентов с сифилисом до 17-го дня с момента заражения. Как показывает статистика, и на 5-6-й неделе болезни только у 25% больных результат будет достоверным. Целесообразно проводить исследование не раньше, чем на 6-7-й неделе с момента предполагаемого заражения.

В связи с неспецифичностью реакции Вассермана в качестве альтернативы чаще используют экспресс метод диагностики сифилиса и следующие лабораторные исследования:

• РИФ;
• РПГА;
• ИФА.

Расшифровка результатов анализа

При первичном сифилисе реакция Вассермана становится положительной на 6-8 неделе течения заболевания (в 90 % случаев), при этом отмечается следующая динамика:

• в первые 15-17 дней после заражения реакция у большинства больных, как правило, отрицательная;
• на 5-6-й неделе заболевания примерно у 1/4 части больных реакция становится положительной;
• на 7-8-й неделе заболевания RW становится положительной у большинства.

При вторичном сифилисе RW положительна всегда. Вместе с другими серологическими реакциями (РПГА, ИФА, РИФ) позволяет не только выявить наличие возбудителя, но и выяснить приблизительный срок заражения.

При развитии сифилитической инфекции на 4-й неделе заболевания, после возникновения первичной сифиломы, реакция Вассермана переходит из отрицательной в положительную, оставаясь таковой и во вторичном свежем, и во вторичном рецидивном периоде сифилиса. В скрытом вторичном периоде и без лечения RW может переходить в отрицательную с тем, чтобы при наступлении клинического рецидива сифилиса вновь стать положительной. Поэтому, в скрытом периоде сифилиса отрицательная реакция Вассермана не свидетельствует о его отсутствии либо излеченности, а лишь служит благоприятным прогностическим симптомом.

При активных поражениях третичного периода сифилиса положительная RW встречается приблизительно в 3/4 случаев заболевания. Когда же активные проявления третичного периода сифилиса исчезают, она часто переходит в отрицательную. В этом случае отрицательная реакция Вассермана у больных не свидетельствует о том, что у них нет сифилитической инфекции.

При раннем врожденном сифилисе RW практически во всех случаях положительна и является ценным методом для верификации болезни. При позднем врожденном сифилисе результаты ее соответствуют таковым, полученным в третичном периоде приобретенного сифилиса.

Большое практическое значение имеет исследование реакции Вассермана в крови у больных сифилисом, подвергающихся лечению. У некоторых больных, несмотря на энергичную противосифилитическую терапию, реакция Вассермана не переходит в отрицательную — это так называемый серорезистентиый сифилис. В данном случае проводить бесконечно противосифилитическую терапию, добиваясь перехода положительной RW в отрицательную, не имеет смысла.

Из изложенного выше следует, что отрицательная реакция Вассермана, не всегда является признаком отсутствия сифилитической инфекции в организме.

Возможна положительная реакция Вассермана у людей при ряде других, не связанных с сифилисом заболеваниях и состояниях: туберкулёзе, системной красной волчанке, заболеваниях крови (лейкемиях), проказе, пемфигусе, лептоспирозе, злокачественных новообразованиях, тифах, скарлатине, болезни бери-бери, сонной болезни, во время беременности, перед родами или после них, менструации, после наркоза, после употребления спиртных напитков, у лиц, злоупотребляющих наркотиками, приёма жирной пищи, лекарств, введения чужеродных сывороток. В таких случаях для уточнения диагноза используются другие методы (РПГА, ИФА, РИФ). Очень характерна неспецифическая положительная реакция Вассермана при малярии, особенно в приступный период. Поэтому если RW положительна у человека без клинических проявлений сифилиса и отрицающего у себя сифилитическую инфекцию, следует подумать о малярии.

Всё перечисленное свидетельствует о том, что положительный результат реакции Вассермана, еще не является безусловным доказательством наличия сифилитической инфекции.

Восстановление после сдачи анализа

После сдачи анализа крови врачи рекомендуют правильное и сбалансированное питание, а также как можно больше жидкости. Можно позволить себе теплый чай и шоколад. Будет полезным воздержаться от физических нагрузок и ни в коем случае не принимать алкоголь.