Условия для иммунофенотипирования лимфоцитов

Общий анализ крови: нормы и причины отклонений

Общий анализ крови (ОАК) – это первое исследование, с которого начинается диагностика заболеваний или профилактический осмотр у врача в рамках ежегодной диспансеризации

Без этого простого, но важного теста невозможно объективно оценить состояние здоровья человека. ОАК иначе называется общеклиническим или просто клиническим анализом крови, но существует также развернутый вариант, который подразумевает детальное изучение лейкоцитарной формулы и применяется в том случае, когда у пациента имеются признаки болезни

В рамках ОАК оцениваются все три форменных элемента крови: эритроциты, ответственные за дыхание органов и тканей, лейкоциты – бойцы иммунитета, и тромбоциты – защитники от кровотечений. Однако в лаборатории определяют не только численность названных клеток. К каждому типу кровяных телец относятся несколько дополнительных показателей, по которым доктор может судить о самых разных аспектах жизнедеятельности конкретного организма. Расшифровка результатов общего анализа крови – задача компетентного врача, терапевта или педиатра, ведь значение имеют не только цифры в бланке, но и сочетание отклонений от нормы друг с другом, а также с данными, полученными в ходе осмотра, опроса и других диагностических мероприятий.

Кровь на общий анализ у взрослых пациентов берут либо из пальца с помощью скарификатора, либо из вены, шприцем. У грудных детей ОАК иногда приходится брать из мочки уха или пятки, потому что пальчики слишком маленькие, а в вену трудно попасть. Считается, что для исследования предпочтительнее венозная кровь – в ней больше эритроцитов и гемоглобина, нежели в капиллярной крови. Кроме того, из вены есть возможность взять сразу много материала, чтобы в случае необходимости проведения дополнительных анализов не направлять человека в лабораторию повторно.

В настоящее время большинство больниц и поликлиник оснащено автоматическим анализатором. Для него взятую у пациента кровь сразу помещают в специальный контейнер с антикоагулянтом – вакутайнер. Анализатор значительно упрощает и ускоряет процесс получения результатов общего анализа крови, однако если обнаруживаются значительные отклонения от нормы в показателях, даже самая умная машина третьего поколения может совершить ошибку в расчетах. Поэтому каждый взятый образец по-прежнему подлежит обязательному нанесению на предметное стекло, окрашиванию и визуальной оценке под микроскопом.

Полученные данные заносятся в типовой бланк и либо направляются лечащему врачу, либо выдаются на руки пациенту. Если исследование проводилось «по старинке», понять записи лаборанта не составит труда, ведь там будут указаны полные названия всех показателей и даже их нормы. Но если общий анализ крови выполнялся на автоматическом анализаторе, итоговый документ будет представлять собой распечатку с непонятными индексами, состоящими из нескольких латинских букв. Тут вам наверняка понадобится расшифровка результатов, а мы предоставим всю необходимую информацию: нормы общего анализа крови для женщин, мужчин и детей разного возраста в виде таблиц и список возможных причин, почему показатели повышены или понижены.

На просторах сети можно встретить массу подобных таблиц разной степени актуальности, и данные в них могут незначительно отличаться. Об этом беспокоиться не стоит, поскольку диагностическое значение имеют явно выраженные отклонения от стандартных цифр. Кроме того, о результатах общего анализа крови можно судить только в совокупности с итогами прочих обследований – по одному лишь ОАК установить правильный диагноз невозможно, да и не нужно пытаться это сделать.

Группа крови ребенка в зависимости от групп крови родителей

С открытием Карла Ландштейнера, австрийского иммунолога, в 1901 году групп крови стало понятно, почему в некоторых случаях переливание крови проходит успешно, а в некоторых заканчивается трагически. Ученый обнаружил, что иногда происходит склеивание эритроцитов, вызывающее смерть человека.

Так, в эритроцитах выделили природные антигены-агглютиногены A и B, а в плазме крови обнаружили антитела к ним-агглютиниты α и β. Агглютиногены наследуются от родителей, они врожденные и неизменны в течение всей жизни. В то время как агглютинины отсутствуют в плазме крови младенцев.

информацияОни вырабатываются в течение первого года жизни в зависимости от наличия собственных антигенов (агглютиногенов), содержащихся в крови (например, если у ребенка вторая группа крови, то агглютинин α образоваться не может).

Также на их синтез оказывают влияние вещества, которые поступают с пищей и синтезируются микрофлорой кишечника.

Была обнаружена еще одна особенность: при встрече одноименных белков (A и α, β и B), происходит реакция склеивания эритроцитов (агглютинация), что и объясняло трагические случаи после переливания крови. Поэтому у одного человека не может быть одноименных агглютиногенов и агглютининов (A и α, B и β).

Используя эти знания, было выделено четыре группы крови:

• I (O) группа-агглютиногенов в эритроцитах нет, в плазме присутствуют агглютинины α и β;
• II (A) группа — в эритроцитах содержится агглютиноген A, а в плазме агглютинин β;
• III (B) группа — в плазме содержится агглютинин α, в эритроцитах — агглютиноген B;
• IV (AB) — в эритроцитах присутствуют агглютиногены A и B, агглютининов в плазме нет;

Итак, группа крови — врожденное сочетание определенных антигенов (агглютиногенов), содержащихся в эритроцитах и антител к ним (агглютининов) в плазме крови.

Как наследуется группа крови

Группа крови и резус-фактор ребенка наследуется от мамы и папы и никогда не меняется. Зная, какая группа крови у родителей, можно предположить, какая может быть кровь у их малыша. Она определяется наличием или отсутствием (в случае первой группы крови) агглютиногенов. Информация о последних закодирована в паре генов, которые могут быть трех видов: JA, JB или j0.

В генетике различают два понятия: генотип и фенотип. Генотип — набор генов. В то время как фенотип-это внешнее проявление конкретного признака, зависящее от генотипа и факторов внешней среды. Так люди с одним фенотипом (в нашем случае с одинаковой группой крови) могут иметь разный набор генов. Зависимость групп крови от генотипа представлены в таблице 1.

Таблица 1. Генотип и фенотип групп крови

Из таблицы видно, что люди со второй и третьей группой крови могут иметь два варианта сочетания генов, а вот первой и четвертой — только одно.

Именно поэтому у мамы и папы со второй группой крови ребенок может иметь помимо аналогичной родительской и первую группу крови. Такое возможно, если у обоих генотип JAJ0. При встрече двух генов J0, у ребенка будет генотип j0j0, что соответствует первой группе крови, а в случае, если к малышу попадут только гены JA или от одного JA, а от другого J0 , ребенок будет иметь вторую группу крови.

Другие возможные комбинации наследования группы крови представлены ниже в таблице 2.

Таблица 2. Возможные группы крови у детей в зависимости от группы крови родителей.

Из таблицы видно, что не всегда группа крови ребенка совпадает с группой крови мамы или папы.

Однако можно выделить несколько закономерностей:

• У родителей, имеющих первую группу крови, не может быть ребенка с другой группой крови;
• Если хоть у одного родителя первая группа крови, то у ребенка не может быть четвертой группы крови;
• Если хоть у одного родителя четвертая группа крови, то у ребенка не может быть первой группы крови.

У каждого есть суперспособность!

Привет, Пикабу! Хочу рассказать вам про группы крови человека немного под другим углом. А то общее представление у всех есть, что их 4, что есть плюс и минус, но на этом всё и заканчивается или идёт какой-то бред. Всё далее описанное будет касаться только крови в разрезе её переливания и никоим образом не претендует на всеобъемлющую толерантную работу.

В нашем организме, как в каких-нибудь бразильских джунглях, куча всего движется и пытается как-то жить. Среди всего этого многообразия тусуются эритроциты, те самые красные кровяные тельца, которые становятся зелёными, если вас покусает зомби. Ну, примерно так это обычно изображают в кино.

Представим, что на наших эритроцитах весело проживают различные не совсем адекватные племена, по-научному называемые «антигены». Они слегка дикие и могут буянить, ездить на приорах, постреливать из калаша, жрать коней, носить джинсы ниже задницы, снимать скальп и так далее.

200 извинений, если я кого-то обидел этим сравнением. Эти их особенности называются медицинским термином «имунность».

И наш организм, как сильное государство, умеет держать под контролем эти яростные народности, заваливая их баблишком, применяя длинные резиновые стимуляторы порядка или организуя изолированные места отдыха.

Само понятие «антиген» означает «генератор антител», то есть это не какая-то няшка, а раздражитель, на который реагирует наш организм и вырабатывает антитела – местный ОМОН. По дефолту, он хорошо справляется только с теми, кого знает с рождения. Ну или кто приехал к нему в полудохлом состоянии, как при вакцинации.

Наверняка, если вы до сюда дочитали, вас уже посетила мысль, что это и есть наша группа крови. Если мы перельём кровь третьей группы, наполненную кочевниками В, человеку со второй, где всю жизнь жили только дикари А, то перекочевавшие интервенты, осознав, что контролировать их некому, устроят настоящий хаос.

Как монголы пришли на Русь и подмяли всё под себя, так же сделают товарищи из нашего примера. Только вместо Руси будет наш организм, который такого набега, скорее всего, не выдержит и просто отойдёт в мир иной. По этим же причинам пациенту Микки с четвёртой группой крови можно переливать любую другую – он готов к этим кочующим цыганам.

А чувствительный мальчик Томми с первой группой является универсальным донором, потому что никто в нём не проживает.

Вторыми по степени отмороженности идут племена C, c, D, E, e, принадлежащие народности «Резус». С ними, в целом, такое же положение дел, как и с группой крови, только комбинаций больше. К слову, этих антигенов так-то почти шесть десятков, но самые занозы в заднице только эти 5. Но и среди них есть безусловные лидеры – аборигены D.

Именно по их наличию или отсутствию определяют положительная кровь или отрицательная. Но так было не всегда, буквально несколько лет назад положительный резус-фактор ставился при наличии любого из C, D, E антигенов. Да, потом случилась амнистия, С и Е получили условно, а D стал тянуть лямку за всю братву со своего региона.

Поэтому ваша группа крови вполне могла быть положительной, а стала отрицательной. Записывается сочетание этих племён примерно так – С-с-D+E+e-, а называется «фенотип». Да, четырьмя вариантами, как с группой крови, тут не отделаешься.

Ну и третью ступень этого сомнительного пьедестала занимает племя Kell. С ними всё не так просто, потому что тусуются они как правило с напарником Chellano. Но нам на это глубоко наплевать, потому что главное, чтобы их просто не было. Нет тела – нет дела.

И у подавляющего большинства людей его нет. Вот и чудненько. А у тех, кто всё же таскает в себе представителей этих меньшинств, кровь брать не имеет практического смыла. Потому что практически некому потом будет перелить эти эритроциты, да и в больницах вообще часто его не определяют.

Да, такая вот дискриминация по кровяному признаку, можно попробовать создать петицию на Change.org. Но и таким донорам не стоит отчаиваться. Они спокойненько могут сдавать плазму, где эти неадекватных антигенов в принципе нет.

Итак, чтобы перелить эритроциты, а речь только о них, ведь кровь в чистом виде давным-давно не переливается, нам нужно знать группу крови, фенотип, и брать только Kell-отрицательные компоненты.

Или по-простому, нам нужно, чтобы переехавшие к больному племена были не борзее, чем его собственные. Иначе, больной если и не склеит ласты, то будет очень огорчён, сильнее чем до переливания. Да, там ещё куча других «племён», но они довольно мирные и никому не угрожают.

Ну либо угрожают в меньшей степени, когда польза значительно больше потенциального вреда.

Белок D, которого может не быть

Резус-фактор в течение жизни не меняется. Он либо есть, либо – нет. За его наличие (присутствие на эритроцитах антигена) отвечает ген, обозначаемый буквой D. Так как в генотипе всегда парный набор хромосом, то у резус-положительных индивидуумов Rh+ набор генов, отвечающих за этот признак — DD или Dd. Большие буквы обозначают доминантный ген, маленькие – рецессивный. Соответственно у Rh— людей в хромосомном наборе присутствуют только dd, т.е. белок антиген вообще не синтезируется.

Если к резус-отрицательному человеку попадают эритроциты несущие резус-фактор, то на чужеродный белок начинают вырабатываться антитела, отчего чужие эритроциты разрушаются, возникает гемолиз. Это может происходить при гемотрансфузии, либо когда Rh— мама беременна Rh+ плодом. В последнем случае, хотя кровотоки мамы и ребенка не смешиваются, но часть эритроцитов плода могут попасть к матери. Поэтому и может возникнуть гемолитическая болезнь новорожденных, причиной которой является резус-конфликт.

Функция

На основе структурной гомологии было предложено, что продукт гена RHD, белок RhD, является мембранным транспортным белком с неопределенной специфичностью (CO ₂ или NH ₃ ) и неизвестной физиологической ролью. Трехмерная структура родственного белка RHCG и биохимический анализ белкового комплекса RhD показывает, что белок RhD является одной из трех субъединиц переносчика аммиака . В трех недавних исследованиях сообщалось о защитном эффекте RhD-положительного фенотипа, особенно гетерозиготности RhD , против негативного влияния латентного токсоплазмоза на психомоторные функции у инфицированных субъектов. RhD-отрицательные по сравнению с RhD-положительными субъектами без анамнестических титров антител против токсоплазмы имеют более короткое время реакции в тестах простого времени реакции. И наоборот, RhD-отрицательные субъекты с анамнестическими титрами (т.е. с латентным токсоплазмозом) проявляли гораздо более длительное время реакции, чем их RhD-положительные коллеги. Опубликованные данные предполагают, что только защита RhD-положительных гетерозигот носит долгосрочный характер; защита RhD-положительных гомозигот снижалась с продолжительностью инфекции, тогда как эффективность RhD-отрицательных гомозигот снижалась сразу после заражения. Общее изменение времени реакции всегда было больше в RhD-отрицательной группе, чем в RhD-положительной группе.

Слабый D

При серологическом тестировании легко идентифицировать кровь с положительным результатом D. Единицы с отрицательным результатом D часто тестируются повторно, чтобы исключить более слабую реакцию. Ранее он назывался D u , который был заменен. По определению, слабый фенотип D характеризуется отрицательной реакцией с реагентом анти-D при немедленном вращении (IS), отрицательной реакцией после инкубации при 37 ° C и положительной реакцией в фазе антиглобулина человека (AHG). Слабый фенотип D может возникать по-разному. В некоторых случаях этот фенотип возникает из-за измененного поверхностного белка, который чаще встречается у людей европейского происхождения. Наследственная форма также возникает в результате ослабленной формы гена R0. Слабый D может также встречаться как «C in trans», в результате чего ген C присутствует на хромосоме, противоположной гену D (как в комбинации R0r ‘или «Dce / dCe»). Тестирование является трудным, поскольку использование разных анти-D реагентов, особенно старых поликлональных реагентов, может дать разные результаты.

Практическое значение этого состоит в том, что люди с этим субфенотипом будут иметь продукт, помеченный как «D-положительный» при сдаче крови. При приеме крови их иногда определяют как «D-отрицательный», хотя это является предметом некоторых споров. Большинство пациентов с «Слабым D» могут без осложнений получить кровь с «D положительным»

Однако важно правильно определить те, которые следует рассматривать как D + или D−. Это важно, так как в большинстве банков крови имеется ограниченный запас крови с отрицательным результатом на D, и правильное переливание имеет клиническое значение

В этом отношении значительно упростило выявление различных вариантов в системе групп крови Rh.

Интерпретация результатов

Интерпретацией результатов занимается специалист

Анализ может выявить изменение общего белка плазмы. В этом случае необходимо исследовать, за счёт какой именно фракции произошло изменение.

Гиперпротеинемия — увеличение общего белка. Если при этом повышено число γ-Г, врач может заподозрить инфекционное заражение. Увеличенная концентрация β-Г чаще всего говорит о патологических процессах в печени. К α-Г относятся белки острой фазы, их рост указывает на интенсивный воспалительный процесс.

Гипопротеинемия — снижение уровня общего белка. Если снижение происходит за счёт фракций α-Г, подозревается наличие деструктивных процессов в печени, поджелудочной железе. Показательным является дефицит фракции γ-Г, что характерно для истощения иммунной системы при хронических патологиях, злокачественных новообразованиях. Понижение β-Г может свидетельствовать о несбалансированном питании при диетах, патологиях органов ЖКТ.

Парапротеинемия — образование нестандартных белков (парапротеинов), что увеличит фракцию γ-Г и будет свидетельствовать о ряде онкологических заболеваний, аутоиммунных патологий.

Дефектопротеинемия — отсутствие какого-либо белка, чаще всего в результате нарушения синтеза белка. Например, фракция α2-Г может быть снижена за счёт нехватки церулоплазмина, как следствия наличия болезни Вильсона.

Заболевания печени могут приводить к диспротеинемии

Диспротеинемия — нарушение количественного соотношения между фракциями белков. При этом уровень общего белка остаётся в норме. Например, при болезнях печени альбумины снижаются, глобулины (за счёт γ-Г) увеличиваются.

Таким образом, результат анализа необходимо рассматривать в комплексе, учитывая корреляцию значений отдельных фракций.

Когда назначают исследование?

Фенотипирование видов лимфоцитов назначают для диагностики ряда заболеваний. Иммунологи назначают исследование, если имеются основания заподозрить одни из них или при наличии «ярких» признаков других. Например: расшифровка количества лимфоцитов с определенным фенотипом понадобится при:

• инфекционных заболеваниях, поражении хронического характера или если болезнь имеет затяжной характер;
• аллергических реакциях организма;
• проявлении устойчивых признаков и симптомов, указывающих на иммунодефицит врожденного или приобретенного свойства;
• подозрении на опухолевые образования доброкачественной или злокачественной природы;
• заболеваниях аутоиммунного типа, спровоцированных расстройством защитной системы, поражением собственного организма;

Диагностика периферической крови требуется в других случаях. Ее назначат перед серьезным оперативным вмешательством, которое требуется больному в плановом порядке. При иммунофенотипировании врач узнает все процессы иммунного характера, происходящие у конкретного больного, что позволяет скорректировать защитные процессы, избежать клеточного поражения, и нормализовать их работу. Большое значение для врача имеют показатели различных видов кровяных телец, Т-клеточный состав крови в послеоперационный период, особенно в случаях с развитием патологических процессов.

Метод применяют и для оценки состояния человека, которому требуется трансплантация органов или проведена операция – анализ на иммунофенотипирование проведут на подготовительном этапе и во время послеоперационного восстановления, чтобы предупредить поражение и отторжение органа. Направление на анализ получают пациенты, лимфоциты которых могут изменить качественный и количественный состав из-за лечения заболеваний медикаментами определенных групп – иммуномодуляторами, иммунодепрессантами или цитостатиками.

Нормы и референсные значения содержания в крови частиц определенного вида зависят от возраста пациента. Врачи для оценки показателей используют специальные таблицы, в которых указаны оптимальные значения, пределы отклонений.

Что такое

Это определение совокупности поверхностных маркеров и, как следствие, принадлежности клеток к той или иной популяции.

Иммунофенотипирование — метод, основанный на реакции антиген-антитело и используемый для определения специфических типов клеток в образцах крови, костного мозга, лимфатических узлов и других тканей. К антителам, которые реагируют со спецефическими антигенами клеток, присоединена особая флуоресцентная метка. Эту метку можно обнаружить с помощью специальных приборов — проточных цитофлюориметров или люминесцентных микроскопов. Иммунофенотипирование с использованием метода проточной цитометрии имеет преимущества перед использованием других методов за счет большей точности, скорости, возможности одновременной регистрации нескольких антигенов на одной клетке.

Информация для доноров — Полезная информация — Редкие фенотипы

Понятие фенотип антигенов эритроцитов человека включает в себя набор антигенов разных систем групп крови, расположенных на поверхности эритроцитов. Этот набор для каждого человека индивидуален. Поэтому при переливании крови и эритроцитарной массы необходимо учитывать совместимость не только по эритроцитарным антигенам системы АВО и резус-фактору, но и по другим эритроцитарным антигенам различных систем.

Антигены системы резус встречаются со следующей частотой: Д – 85 %; С – 70 %; с – 80 %; Е – 30 %; е – 97,5 %. Антигены системы резус обладают способностью вызывать образование иммунных антител. Наиболее активным в этом отношении является антиген Д, который и подразумевается под термином «резус – фактор». Именно по наличию или отсутствию антигена Д все люди делятся на резус – положительных и резус – отрицательных.

Редким фенотипом крови считается фенотип редко встречающийся в популяции. К примеру, фенотип ccddee – резус-отрицательный имеют около 15% населения, а фенотип ссDEE – 2%, (отсутствует антиген е). Фенотип крови по системе РЕЗУС (Rh) отрицательный — ссddee или (C-,c+,C W -, D-,E-,e+) относится к редким фенотипам крови

При необходимости переливания крови реципиенту, имеющего такой фенотип, это становится жизненно важно, так как на отсутствующие у реципиента антигены, организм может вырабатывать антитела

Чтобы избежать всевозможных осложнений, каждому человеку необходимо знать свой фенотип крови. Сделать это можно в специализированной иммуносерологической лаборатории ККЦК №1, где произведут фенотипирование образца вашей крови по всем иммуногенно- значимым системам крови.

Совместимость людей

Исследование этой особенности необходимо в первую очередь для того, чтобы понять совместимость крови донора и пациента, который рассчитывает на ее получение. При несовпадении фенотипов переливание может привести к тяжелым осложнениям, даже к смерти больного. Таким образом, пациенту с 2 отрицательной группой крови нельзя переливать ту же группу, но с наличием положительного резус-фактора. Забегая вперед, хочется добавить, что за резус-фактор отвечает латинская буква D, при наличии в фенотипе которой пациент считается резус-положительным и наоборот.

Проверка совместимости крови проводится в первую очередь по совпадению антигенов, обладающих различной силой воздействия, которая также называется иммуногенностью.

Что это такое?

Итак, группой крови называется уникальная комбинация белков-антигенов на внешней поверхности эритроцитов и в сыворотке крови. Первые из них называются агглютиногены, а вторые , агглютинины.

Групповые антигены синтезируются на наружной поверхности эритроцитарной мембраны и являются наследуемыми признаками, то есть достаются от матери и отца и не изменяются в течение нашей жизни (но существуют некоторые патологические состояния, которые могут изменять структуру агглютиногенов).

Современной медицинской науке известно порядка 270 эритроцитарных белков, которые в свою очередь формируют 26 систем групп крови. Самое большое значение имеют белки, которые с наибольшей степенью вероятности вызывают осложнения после трансфузий, прежде всего это антигены систем АВ0 и Rh (Резус).

Однако человеческая кровь не ограничивается лишь белками системы АВ0, а содержит в себе антигены и других систем, которые также располагаются на поверхности красных кровяных клеток. Эта комбинация уникальна для каждого человека.

В отличие от множества других систем групп крови, системы АВ0 и Rh признаются трансфузиологами во всем мире, поэтому их используют при определении групповой принадлежности крови человека, в донорстве и во время переливания цельной крови или её компонентов.

Каждый человек имеет свой набор агглютиногенов и агглютининов. Давайте узнаем, какая из существующих групп самая редкая, а какая встречается чаще всего.

Что такое группа крови и чем они отличаются рассказывается на видео:

Белок D, которого может не быть

Резус-фактор в течение жизни не меняется. Он либо есть, либо – нет. За его наличие (присутствие на эритроцитах антигена) отвечает ген, обозначаемый буквой D. Так как в генотипе всегда парный набор хромосом, то у резус-положительных индивидуумов Rh+ набор генов, отвечающих за этот признак — DD или Dd. Большие буквы обозначают доминантный ген, маленькие – рецессивный. Соответственно у Rh— людей в хромосомном наборе присутствуют только dd, т.е. белок антиген вообще не синтезируется.

Если к резус-отрицательному человеку попадают эритроциты несущие резус-фактор, то на чужеродный белок начинают вырабатываться антитела, отчего чужие эритроциты разрушаются, возникает гемолиз. Это может происходить при гемотрансфузии, либо когда Rh— мама беременна Rh+ плодом. В последнем случае, хотя кровотоки мамы и ребенка не смешиваются, но часть эритроцитов плода могут попасть к матери. Поэтому и может возникнуть гемолитическая болезнь новорожденных, причиной которой является резус-конфликт.