Содержание
Количественное определение белка в моче колориметрическим методом с пирогаллоловым красным.
Принцип
метода:
при взаимодействии белка с пирогаллоловым
красным и молибдатом натрия образуется
окрашенный комплекс, интенсивность
окраски, которого пропорциональна
концентрации белка в пробе.
Реактивы:
Рабочий
реагент – раствор пирогаллолового
красного в сукцинат-ном буфере,
калибровочный раствор белка с концентрацией
0,50 г/л
Ход работы:
Отмерить |
Моча |
Калибратор |
Вода дист. |
Моча |
20 |
─ |
─ |
Калибратор |
─ |
20 |
─ |
Вода дист. |
─ |
─ |
20 |
Рабочий реагент |
1000 |
1000 |
1000 |
Пробы
перемешать, выдержать 10 мин. при комнатной
температуре (18 -25ºС). Измерить оптическую
плотность опытной (Dоп)
и калибровочной пробы (Dк)
против контрольной пробы при λ=598
(578-610) нм. Окраска стабильна в течении 1
ч.
Расчет:
концентрацию
белка в моче (С) г/л рассчитать по формуле:
С=
Dоп/Dк×0,50
где:
Dоп
= Dк=
C
= г/л.
Нормальные
величины:
до 0,094 г/л, (0,141 г/сут)
Вывод:
Диагностика
При обнаружении вышеперечисленных жалоб, которые не являются специфическими для протеинурии пациенту необходимо обратиться к терапевту для дальнейшей диагностики. Наличие белка в моче может протекать бессимптомно и выявляется только при прохождении медицинских осмотров.
Первичный осмотр больного проводит врач-терапевт. В него входят сбор анамнеза, физикальный осмотр, лабораторное и инструментальное исследование.
Анамнез включает в себя жалобы пациента, что в 70% случаев помогает поставить предварительный диагноз.
Физикальный осмотр состоит из пальпации, при которой врач отмечает увеличение почки, и перкуссии (выстукивание) почек, которая помогает выделить болевую симптоматику.
Лабораторное исследование состоит из ОАК (общий анализ крови) и ОАМ (общий анализ мочи). ОАМ показывает количественное содержание белка и помогает определить степень протеинурии:
СтепеньКоличество белкаЛегкая0-0,5 г/лУмеренная0,6-2 г/лТяжелая больше 2 г/л Инструментальная диагностика при первичном осмотре заключается в УЗИ-исследовании. При данном методе определяется размер почек, ширина лоханок, проходимость мочеточников.
После первичного осмотра терапевт дает направление к нефрологу или урологу, где врач проводит более точную диагностику заболевания с выявлением основной причины.
Другие диагностические методы:
- Тест-полоска, на который нанесен сухой реагент, помогает определить содержание альбумина и низкомолекулярных белков.
- Количественный метод определения белка в моче с использованием красителя — пирогаллоловый красный, который содержит ионы молибдена и образует красный комплекс с пептидами.
- Определение соотношения белок/креатинин в разовой порции мочи. В норме отношение ≤ 0,2 грамм белка на 1 грамм креатинина, а при нефротическом синдроме ≥ 3,5 грамм.
- Определение протеинурии в суточном сборе мочи. Норма — до 0,15 г/сут., легкая — 1 г/сут., умеренная — 1-3 г/сут., тяжелая — 3 г/сут.
Норма белка в моче у женщин и мужчин
В моче здорового человека белка содержится не более 0,003 г/л — в разовой порции урины это количество даже не выявляется.
Для объема суточной мочи показатель нормы — до 0,1 г. Для белка в моче норма у женщин и мужчин одинакова.
У ребенка до 1 мес. нормальные значения составляют до 0,24 г/м², а у детей старше месяца она снижается до 0,06 г/м² поверхности тела.
Продукты, повышающие белок в моче
Избыток белковой пищи повышает нагрузку на почки. Организм не имеет свойства накапливать излишек белков — запасы веществ и энергии всегда откладываются в виде жира, либо сжигаются в процессе физической активности.
Если вы придерживаетесь белковой диеты или в рационе преобладают такие продукты, то избыток белка будет неизбежно возрастать. Организму необходимо либо преобразовать его (в жир при малоподвижном образе жизни, в мышечную массу и энергию при движении). Но скорость метаболических процессов ограничена, поэтому наступит момент, когда протеин начнет выводиться с мочой.
Если вы едите много белковой пищи, важно каждый день потреблять не меньше 2,5 л чистой воды и активно двигаться. В противном случае почки не смогут нормально фильтровать мочу, что может привести в нарушению обмена веществ и развитию мочекаменной болезни
Фильтрующую способность почек снижают и другие продукты:
- Спиртные напитки раздражают паренхиму органов, сгущают кровь, повышая нагрузку на систему мочевыделения;
- Соленая и сладкая пища задерживает воду в организме, замедляя ее свободное продвижение — развиваются застойные явления и отеки, что
- Повышает токсичность крови — это негативно сказывается на работе почечных фильтров.
Механизм появления белка в моче
Образование мочи происходит в основном структурном элементе почки — почечном клубочке (сети артериальных капилляров, заключенных в капсулу).
Кровь, поступающая в капилляры клубочка, фильтруется через специальную клубочковую мембрану с образованием первичной мочи. Клубочковая фильтрационная мембрана имеет достаточно сложное строение и включает в себя:
- 1Внутренний слой, представленный эндотелием, большая часть которого покрыта порами диаметром 40 нм. Поры прикрыты диафрагмой, поэтому фильтрации белка на данном этапе определяется и размером пор, и состоянием этой диафрагмы;
- 2Трехслойную мембрану (базальную), находящуюся кнаружи от внутреннего слоя. Ее проницаемость для белковых молекул определяется ее электрическим зарядом и расположением коллагеновых филаментов;
- 3Эпителиальную выстилку (подоцитарный аппарат), расположенную с мочевой стороны от базальной мембраны. Этот слой отвечает за процесс активной фильтрации с помощью микрофиламентов.
У здорового человека клубочковый фильтр может пропускать белки определенного размера (не более 4 нм, массой не более 70 кДа). Свободно фильтруются такие белки, как альбумин сыворотки, миоглобин, преальбумины, лизоцим, микроглобулины и т. д.
Помимо размера большую роль в процессе фильтрации играет заряд протеиновой молекулы. Базальная мембрана в норме заряжена отрицательно и не допускает активную фильтрацию белков плазмы, имеющих тот же заряд.
Рисунок 1 — Строение нефрона
Если некрупным плазматическим белкам удается пройти почечный фильтр, то они почти полностью всасываются в почечных канальцах.
Резюмируя вышесказанное, физиологическая экскреция белка является результатом взаимодействия клубочкового и канальцевого механизмов, а поражение любого из отделов нефрона может приводить к протеинурии.
Выявление у человека преходящей или постоянной протеинурии требует тщательного его обследования. Далее перейдем к изучению основных причин повышения уровня белка в моче.
Анализ мочи по Нечипоренко: для чего, как правильно собирать мочу?
Такой метод диагностики был предложен знаменитым врачом Нечипоренко
Важно отметить, что такое исследование никак не может заменить общий анализ мочи, а лишь дополняет его и проводится исключительно в случае необходимости. Чаще всего такую диагностику назначают в случае каких-либо отклонений в показателях в общем анализе
Итак, более точный анализ мочи уместно делать если:
- При общем исследовании обнаружился белок.
- Обнаружилась кровь.
- Обнаружились лейкоциты.
- Мочевина или креатинин в исследуемом материале присутствуют в повышенном количестве.
- При наличии недугов мочевыводящей системы.
- При наличии недугов, которые могут повредить почки.
- Во время вынашивания ребенка для определения наличия патологии в развитии плода и протекании беременности.
Сдаем правильно
Такой метод диагностики способен выявить ряд недугов мочевыводящей системы и почек:
- Камни в почках
- Воспаление в почках
- Наличие новообразований
- Воспаление мочевого пузыря, которое спровоцировано инфекциями и т. д.
- Отклонения в развитии плода и нарушение протекания беременности
Дабы результат анализа был максимально точным и корректным, необходимо при его сдаче придерживаться определенных весьма простых правил:
- За несколько дней до сбора материала для анализа не занимайтесь тяжелыми физическими нагрузками, силовыми видами спорта и тяжелой стоячей работой.
- Воздержитесь от походов в баню, сауну и т. д.
- Также за пару дней до сдачи анализа уменьшите количество потребляемой белковой пищи, соков, в частности из моркови и свеклы, исключите всю острую, жирную и сладкую пищу, алкоголь в любом виде и количестве.
- Прекратите принимать медикаменты, в частности мочегонные, антибактериальные, противовоспалительные. Если сделать это по каким-то причинам вы не можете, сообщите об этом врачу и согласуйте с ним этот момент.
- За сутки до сбора исследуемого материала не уменьшайте и не увеличивайте количество потребляемой жидкости.
- Собирайте материал для анализа только в специальную чистую тару.
- Перед сбором мочи подмойтесь.
- Необходимо собрать первую мочу после сна, при этом собирается жидкость только в середине мочеиспускания.
- Для проведения анализа с помощью собранной мочи есть 2 часа, после материал будет непригодный. Об этом стоит помнить, собираясь сдавать анализ.
- Стоит воздержаться от проведения анализа во время месячных, некоторых «женских» болезней и острых воспалительных процессов.
По Нечипоренко
Норма полученных значений такая:
- эритроциты – 1000/мл
- лейкоциты – 2000/мл
- гиалиновые цилиндры – 20/мл
- Если в результате вы увидите другие значения, обязательно проконсультируйтесь с лечащим врачом, он оценит состояние вашего здоровья и назначит правильное и эффективное лечение