Нет чувствительности к фагам

Какую информацию получают из анализа?

В лабораторных условиях состав каловых масс оценивают по содержанию полезных и патогенных и условно-патогенных организмов. Из-за разных факторов флора теряет нужные бактерии, в ней повышается объем патогенной флоры.

Анализ необходим при следующих симптомах:

• диарея, запор;
• метеоризм;
• дискомфорт или боль в животе;
• непереносимость некоторых продуктов;
• инфекция кишечника;
• аллергия;
• сыпь на коже;
• нарушение кишечного биоценоза;
• долгая терапия противовоспалительными средствами.

Посев кала часто назначают новорожденным, находящимся в группе риска и подросткам, страдающими регулярными аллергиями и ОРВИ.

Помимо наличия симптомов, врач может направить пациента на анализ по многим причинам:

• рахит, анемия у детей;
• последствия кишечной инфекции, которая сопровождалось диареей с кровью;
• терапия гормонами;
• слабая иммунная система;
• прием антибиотиков.

Также на анализ направляют новорожденных, у матери которых мастит или вагинит и младенцев, пребывание в родильном доме которых превысило определенные нормы.

Направление на исследование выдает гастроэнтеролог, инфекционист или терапевт. От пациента требуется собрать материал правильно, чтобы получить достоверные результаты.

Аэробные спорообразующие микробы

Одними из наиболее устойчивых бактерий к различным факторам окружающей среды являются микроорганизмы, обладающие способностью к образованию спор. Способность бактерий к образованию спор широко применяется в промышленности для производства ферментов, органических кислот, антибиотиков и других веществ. Встречаются и патогенные для человека типы спор, такие как сибиреязвенная бацилла.

Образование спор некоторых бактерий является основной проблемой в консервном производстве, консервации крови, пищевых и сельскохозяйственных продуктов. Распространенность спор в природе довольно широка, так как такие бактерии обнаруживаются повсеместно. Способность к образованию спор – один из уникальных механизмов устойчивости микробов к различным повреждающим действиям окружающего мира.

Общая информация

Определение чувствительности к бактериофагам представляет собой микробиологическое исследование, которое направленно на обнаружение бактериофагов, к которым обладают чувствительностью патогенные бактериальные клетки. Бактериофаги, производятся фармакологической промышленностью в различных формах, жидких, таблетированных. Показанию к проведению этого лабораторного исследования является заболевания кишечника. Данный тест считается одним из дополнительных методов терапии кишечных инфекций, энтероколитов, гнойных ран, циститов и некоторых других инфекционных заболеваний.

Бактериофаги – это вирусы, которые избирательно поражают бактериальные клетки. При внедрении в бактериальную клетку бактериофаг вызывает лизис бактерий. Иными словами, бактериофаги – это специфическая живая лекарственная форма способная уничтожать определенные виды бактерий. В медицинской практике бактериофаги применяются в качестве дополнительного метода терапии некоторых инфекционных заболеваний вместе с антибиотиками.

Антибактериальный эффект препаратов бактериофагов основан на внедрении генома фага в бактериальную клетку с последующим его размножением и лизисом зараженной клетки. Вышедшие во внешнюю среду в результате лизиса бактериальной клетки бактериофагов способны повторно инфицировать и лизировать другие бактериальные клетки, так они действуют до полного уничтожения патогенных бактерий в воспалительном очаге.

В результате интенсивного развития химической промышленности, созданием и внедрением новых антибиотиков и антисептиков интерес к бактериофагам значительно снизился.

В наше время на фоне повышения резистентности к антибиотикам основных возбудителей инфекционных осложнений у пациентов хирургического и травматолого-ортопедического профиля, возникновением новых полирезистентных штаммов патогенных бактерий, поиск и создание новых высокоэффективных лекарственных средств, которые бы обладали высокой антибактериальной активностью продолжается.

В настоящее время имеются сведенья о использовании бактериофагов в терапии инфекционных заболеваний и осложнений различного генеза, а также различных хирургических инфекций.

Использование в лечении инфекционных заболеваний бактериофагов обладает рядом преимуществ:

бактериофаги демонстрируют высокую специфичность в терапии инфекционных заболеваний;

они не ингибируют развитие нормальной микрофлоры;

они не вызывают дисбаланс внутренней среды организма;

фаготерапия является этиотропной и обладает высокой специфичностью;

применение бактериофагов не имеют противопоказаний, что позволяет их использовать в терапии беременных и кормящих женщин, а также детей различного возраста, включая недоношенных;

бактериофаги могут использоваться не только в терапевтических, но и профилактических целях;

они не вызывают развития резистентности микроорганизмов;

они оказывают стимулирующего влияния на гуморальное и клеточное звенья иммунитета;

они не оказывают токсического воздействия, не провоцируют развитие аллергических реакций и не обладают тератогенным эффектом;

они демонстрируют высокую эффективность в монотерапии, но также могут применяться совместно с другими лекарственными средствами, например, антибиотиками и пробиотиками.

При использовании бактериофагов необходимо учитывать, что при отсутствии фагочувствительности к ним у выделенного микробного агента, возбудителя инфекционно-воспалительного процесса, это может способствовать усилению или развитию антибиотикорезистентности у возбудителя. Кроме этого, имеется риск развития реакции обострения Яриша–Гексгеймера, которая возникает на фоне высвобождения значительного количества токсинов, в случае массивной гибели микробов при внутривенном введении бактериофага.

Данное исследование направлено на определение чувствительность возбудителей инфекционных осложнений у пациентов после травм и оперативных вмешательств на опорно-двигательной системе к препаратам бактериофагов.

Исследование кала в обычных условиях

Что же показывает анализ кала на дисбактериоз кишечника, сданный в государственной поликлинике или частной лаборатории?

Полученные фекалии врач-лаборант специальной петлёй помещает в специальные стеклянные контейнеры, заполненные смесью питательных веществ. Контейнеры выдерживаются несколько суток при благоприятной температуре и влажности. Сколько дней делается анализ кала на дисбактериоз? Обычно около 7 дней. За это время бактерии прорастают на питательной среде и создают колонии. Врач оценивает внешний вид колоний, особенности роста, проводит исследование под микроскопом. Собранные данные интерпретируются, и пациенту выдаётся окончательный результат.

Бланк анализа включает следующие показатели:

1. Бифидо- и лактобактерии.
2. Кишечная палочка с различными свойствами.
3. Стафилококки разных подтипов. Золотистый стафилококк.
4. Энтерококки.
5. Грибы Кандида.
6. Патогенные и гемолитические бактерии.

Считается, что микроорганизмы из пунктов 1-5 являются обычными обитателями кишечника. Подразумевается, что микробы из пункта 6 не должны высеваться у здоровых людей.

Каждая лаборатория даёт собственные нормы количества бактерий и грибов. Превышение содержания микробов в анализе на дисбактериоз описывается как пролиферация. Что это такое? Термин обозначает избыточный рост микроорганизмов по нормам, принятым в конкретной лаборатории.

Почему обычный анализ малоинформативен

Раз проводится бактериологический анализ фекальных масс, значит, дисбактериоз можно выявить и начать лечить?

Стандартный посев практически не отражает истинную картину происходящего в кишечнике по следующим причинам:

• принесённый на анализ кал содержит микробы лишь конечного отдела кишечника. Микробиота же вольготно располагается на всём протяжении пищеварительной трубки. Бактерии обнаружены в желудке, всех отделах кишки. Обычному исследованию на дисбиоз доступна малая часть всех бактерий. Флора тонкой кишки, большая часть толстой останется за кадром;
• лабораторно высевают лишь около 10 видов микроорганизмов. В то время как кишечник является пристанищем для более чем 400 видов бактерий. По некоторым сведениям разнообразие типов микробиоты превышает 1000 наименований;
• посев кала покажет небольшой процент флоры, обитающей в просвете толстой кишки. Значительную же часть бактерий составляют пристеночные микроорганизмы. Подобных микробов примерно в 6 раз больше, обычный бактериологический анализ не покажет состав пристеночной компании;
• микробиологический состав кала, выявленный при анализе на дисбиоз, варьируется ежесуточно в зависимости от пищи, принимаемых лекарств и множества факторов. Можно проглотить пищу, заражённую злобными бактериями, которые будет высеваться при стандартном исследовании. Пациент при этом прекрасно себя чувствует, так как внутренние дружественные микробы самостоятельно справились с пришельцем и нейтрализовали вредное влияние;
• состав кишечной флоры уникален для каждого взрослого и ребёнка. Бактерии, считающиеся патогенными (потенциально опасными), годами могут проживать внутри, не вызывая проблем.

Когда полезен подобный анализ

Бактериологический посев кала необходим только тогда, когда врач заведомо знает, что ищет. Речь идет об инфекционных болезнях, поражающих кишечник. У пациента обязательно присутствует клиника острого инфекционного поражения с температурой, поносом, рвотой.

Доктор по симптомам заподозрит возбудителя, но для точной идентификации необходим посев фекалий. Лечение в любом случае начинают раньше получения результатов, так как ждать неделю нельзя.

Показания к анализу кала

Данное обследование назначается с целью:

• определения возбудителей некоторых видов заболеваний;
• для определения наиболее эффективных для лечения препаратов;
• для оценки правильности проводимого лечения.

Анализ кала на бактериофаги проводится чаще всего для подбора препаратов, способных уничтожить болезнетворные микроорганизмы, поселившиеся в кишечнике. Бактериофаги в отличие от антибиотиков являются живыми микроорганизмами. Они действуют узконаправленно на определенные виды бактерий. Потребность в таком исследовании возникает:

• после длительного приёма антибиотиков, противовирусных препаратов;
• после прохождения курса химиотерапии;
• после длительного приема гормональных препаратов;
• при резком снижении иммунитета;
• у пожилых пациентов в связи с изменением флоры кишечника под влиянием возрастных изменений, таких как увеличение бактерий усиливающих синтез холестерина и увеличение бактерий, относящихся к гемолитической флоры;
• при обследовании пациентов с хроническим панкреатитом, хроническим алкоголизмом и другими состояниями, сопровождающимися мальабсорбцией.

Исследование кала проводится в том случае, если пациент обращается с жалобами:

• на изменение консистенции кала;
• на изменение цвета и запаха;
• при появлении посторонних примесей в виде слизи и частиц непереваренной пищи.

Чаще всего анализ назначается лечащим врачом.

Как проводится выявление микроорганизмов методом посева и для чего нужен этот анализ

Для этого берутся образцы крови, мочи, слюны, секрета простаты, семенной жидкости, слизи из уретры и цервикального канала, носоглотки, мокроты, грудного молока, содержимого ран и язв. Материал переносится на питательные среды – специальные смеси, на которых микробы лучше всего растут. Для посева используются плоские чашечки Петри или пробирки.

Затем образец помещают в температурные условия, наиболее благоприятные для микробного роста, и оставляют на определенное время. Через некоторое время на питательных средах начинают появляться микробные колонии – скопления возбудителя, расположенные внутри среды или вовне.

Снаружи разрастаются анаэробные микробы, которым для жизни требуется воздух. Внутри питательной среды развиваются анаэробы – микробы, не любящие воздух и развивающиеся без него.

Из полученных колоний делают мазки, которые рассматривают под микроскопом, чтобы выяснить, какая именно микробная культура высеялась. Делается также вывод об их количестве (обсемененности). Этот показатель важен для дозировки применяемых препаратов. Чем больше обнаружено возбудителей, тем выше будет доза антибактериального средства, назначенного врачом.

Количественный анализ учитывается при выявлении условно-патогенной микрофлоры. Эти микробы и грибки не доставляют проблем, если находятся в организме в ограниченном количестве. Однако превышение норм приводит к болезням, поэтому требует назначения лекарств. Один из самых известных условно-патогенных микроорганизмов – грибок кандида, вызывающий при разрастании его колоний кандидоз (молочницу).

При проведении анализа определяется чувствительность микрофлоры к антибиотикам. Для этого проводится специальный тест, называемый антибиотикограммой.

Патогенные бактерии пересаживают в благоприятную среду и подвергают воздействию различных антибактериальных средств. Для этого в чашку Петри, где находятся колонии микробов, помещают бумажные полоски, смоченные в антибиотике. Через 3-5 дней оценивают результат:

• Микробная гибель на расстоянии 2,5 см от полоски говорит о высокой чувствительности микробов к данному антибактериальному препарату.
• Если все возбудители умерли в радиусе 1,5-2,5 см, чувствительность к антибиотику средняя.
• Если микробы погибли на расстоянии менее 1,5 см от полоски, чувствительность будет слабой. Такой препарат применять нежелательно.
• При отсутствии гибели колоний считается, что данный антибиотик на эту микрофлору не действует.

Степень чувствительности указывается в результатах анализов, чтобы врач потом мог назначить наиболее эффективные препараты.

Таким же образом проводится анализ на чувствительность к бактериофагам – специальным вирусам, убивающим определенные виды бактерий.

Микробиологическая диагностика позволяет выбрать из огромного количества выпускаемых препаратов наиболее подходящий и эффективный.

Разновидности фагов

Различают две группы бактериофагов в зависимости от скорости уничтожения бактериальных колоний.

Умеренные

Уничтожают только некоторые бактериальные клетки, вступая с выжившими в своеобразный симбиоз. ДНК такого бактериофага встраивается в ДНК бактерии (так называемый профаг) и передается будущим бактериальным поколениям. Такие культуры бактерий называют лизогенными – в определенный момент они дают жизнь новым свободным бактериофагам, которые переходят из нуклеоида в цитоплазму и способны лизировать бактерии соседних колоний. При этом чувствительность к бактериофагу у лизогенной колонии отсутствует.

Вирулентные

Лизируют все бактериальные клетки, давая жизнь новым фагам, которые уничтожают колонию в течение 30-40 минут, после чего частично гибнут, а частично инкапсулируются и переходят в спящее состояние.

Как определяют чувствительность к фагам

Определение чувствительности бактериальных культур к бактериофагам проводят при помощи микробиологических методов – на твердых или полужидких питательных средах. Обычно используют один моновалентный и два поливалентных фага.

Определение чувствительности колоний к бактериофагу может использоваться для различных целей:

1. Фаготипирование. Определение штаммов бактерий по их чувствительности к фагам. Используется при проведении эпидемиологических исследований.
2. Фагоидентификация. Определение видов бактерий по их отношению к фагам.
3. Фагодиагностика. Выделение фагов из организма пациента, свидетельствующее о наличии соответствующих бактерий.
4. Фагопрофилактика. Применяется при опасности заражения дизентерией. Чувствительность возбудителей к фагам позволяет проводить эффективную профилактику в очагах этого заболевания.
5. Фаготерапия. Наиболее часто применяется для лечения заболеваний, вызванных стафилококком, шигеллами, протеем.

Применение бактериофагов показано только в случае, если выполнено определение чувствительности к бактериофагу, иначе этот дорогостоящий метод может не дать ожидаемого эффекта. Такие препараты используют для лечения инфекций у новорожденных, гнойных ран, а также инфекций мочевыводящей системы – уретритов, пиелонефритов, циститов.

Сравнение профилактического и терапевтического использования фагов и антибиотиков

Бактериофаги

Антибиотики

Воздействие на бактерии

Фаги эффективно убивают чувствительные клетки бактерий (их действие бактерицидное).

Некоторые антибиотики (например, хлорамфеникол) бактериостатические; они скорее ингибируют рост бактерий, чем убивают клетки.

Селективность действия

Высокая селективность бактериофагов позволяет нацеливаться на специфичных патогенов, не затрагивая нормальную бактериальную флору (например, маловероятно, что фаги будут враждебны по отношению к нормофлоре пациентов).

Антибиотики атакуют не только бактерий – возбудителей заболеваний, но также все чувствительные микроорганизмы, включая нормальную – и часто полезную – микрофлору хозяина. Поэтому их неселективное действие нарушает микробный баланс в организме пациента, что может привести к различным побочным эффектам.

Побочные эффекты

Незначительные побочные эффекты при применении лечебных фагов (могут быть вызваны высвобождением эндотоксинов из бактерий, лизированных in vivo фагами).

Для антибиотиков характерно множество побочных эффектов, включая кишечные расстройства, аллергии и вторичные инфекции (например, грибковые инфекции).

Разработка новых препаратов

Естественная коэволюция бактерий и фагов может облегчить получение новых литических фагов против фагоустойчивых бактерий, появляющихся в результате действия других фагов или естественных изменений в бактериальных популяциях.

Создание новых антибиотиков (например, против антибиотикоустойчивых бактерий) требует временных затрат и может занять много лет.

Устойчивость бактерий к действию препарата

Из-за специфичности фагов маловероятно появление устойчивости у других бактериальных видов, не являющимися мишенями терапии.

Из-за широкого спектра активности антибиотики могут приводить к отбору устойчивых мутантов многих видов бактерий, а не только у штаммов мишени.

Применение препарата

Из-за специфичности фагов их успешное использование для предупреждения и лечения бактериальных инфекций требует идентификации этиологического агента и определения его фагочувствительности к препарату in vivo перед началом фагового лечения.

Эмпирически назначенные до идентификации этиологического агента антибиотики с большей вероятностью будут эффективны нежели фаговые препараты.

Отличия бактериофагов и антибиотиков

1. Фаг «бьет» точно в цель, как снайпер. Действие антибиотика – это «бомбежка» по местности, где есть свои и чужие.

Поэтому антибиотики часто вызывают дисбиоз кишечника. Фаги – нет.

2. Антибиотики обязательно действуют и на другие органы.

Например, так любимый многими докторами Амоксиклав может привести к антибиотико-ассоциированному колиту, гепатиту, интерстициальному нефриту.

Цефалоспорины «сажают» печень, почки, могут вызвать изъязвления слизистой рта.

Сумамед тоже не лучшим образом действует на печень, почки, может давать побочные в виде сердцебиения, головокружения, головной боли, сонливости.

Отличия антибиотиков от бактериофагов я собрала в этой таблице:

Категории

АллергологАнестезиолог-реаниматологВенерологГастроэнтерологГематологГенетикГинекологГомеопатДерматологДетский гинекологДетский дерматологДетский кардиологДетский лорДетский неврологДетский офтальмологДетский пульмонологДетский ревматологДетский урологДетский хирургДетский эндокринологДиетологИммунологИнфекционистКардиологКлинический психологКосметологЛогопедЛорМаммологМедицинский юристНаркологНевропатологНейрохирургНефрологНутрициологОнкологОнкоурологОртопед-травматологОфтальмологПаразитологПедиатрПластический хирургПроктологПсихиатрПсихологПульмонологРевматологРентгенологРепродуктологСексолог-АндрологСтоматологТерапевтТрихологУрологФармацевтФитотерапевтФлебологФтизиатрХирургЭндокринолог