Андрей Смирнов
Время чтения: ~8 мин.
Просмотров: 1

Полимеразная цепная реакция (пцр) диагностика: что это такое

ПЦР мочи как контроль после лечения

Моча методом ПЦР проверяется не только для первичной диагностики заболевания.

Методика также применяется для контроля лечения.

Анализ сдают через 2-4 недели после завершения антибиотикотерапии.

ПЦР позволяет понять:

  • исчезли ли бактерии из мочеполовой системы;
  • если нет, уменьшилось ли их количество (при кандидозе, уреаплазмозе, микоплазмозе).

Одновременно врач оценивает клинические симптомы.

При отсутствии ДНК патогенов в моче и нормализации состояния пациента он считается излечившимся.

Дальнейшее наблюдение за человеком не требуется.

Иногда случается так, что ПЦР мочи снова дает положительный результат.

Бактерия или простейшие обнаруживаются даже после проведенного лечения.

Это говорит о том, что оно было неудачным.

Вероятные причины:

  • человек не принимал препараты в том режиме, в котором их ему назначил врач;
  • он обратился к плохому доктору, и тот назначил неэффективное лечение;
  • бактерии оказались нечувствительными к используемым антибиотикам.

При неудачном лечении его придется повторить.

Курс проводится с использованием противомикробного препарата другой фармакологической группы.

ПЦР мочи на ЦМВ

Цитомегаловирус относится к семейству герпеса.

Этот вирус может передаваться половым путем.

После острого заболевания патология переходит в латентную форму.

В дальнейшем вирус может реактивироваться.

Он считается оппортунистической инфекцией.

ЦМВ способен вызывать тяжелые воспалительные процессы в организме людей с иммунодефицитом.

Вирус опасен для беременных женщин.

Поэтому проверять ЦМВ в моче с помощью ПЦР целесообразно не только при появлении симптомов, но также с профилактической целью:

  • при планировании беременности;
  • в первом триместре, если анализ не сдавался на этапе подготовки.

Цитомегаловирус очень опасен для развивающегося плода и новорожденного ребенка.

Он может стать причиной самопроизвольного аборта или инфицирования малыша во время родов.

Для диагностики используется не только ПЦР, но также серологические анализы крови.

В ней определяются уровни антител.

Дополнительное использование серологического теста позволит не только определить факт наличия вируса в организме, но также понять:

  • острый это процесс или хронический (давно ли заразилась женщина, или инфицирование произошло в течение последних нескольких недель);
  • латентное течение болезни или обострение.

Основные показания к проведению ПЦР мочи на цитомегаловирус:

  • клиническая картина инфекционного мононуклеоза (исследование проводится одновременно с определением вируса Эпштейна-Барр или после получения отрицательных результатов на эту инфекцию);
  • увеличение печени и селезенки неустановленного происхождения;
  • длительная (свыше 10 дней) гипертермия;
  • лабораторные признаки нарушения функции печени при отрицательных результатах анализов на вирусные гепатиты, отсутствия токсического гепатита или алкогольной болезни печени;
  • ВИЧ;
  • длительный прием цитостатиков или иммунодепрессантов;
  • другие иммунодефициты.

Показания для женщин:

  • планирование беременности (ЦМВ входит в группу TORCH – самых опасных заболеваний для беременных женщин);
  • невынашивание беременности в анамнезе;
  • признаки внутриутробной инфекции плода;
  • фетоплацентарная недостаточность.

Результат обычно выдается качественный.

Вирус либо обнаружен, либо нет.

Количество не определяется, так как оно не всегда отражает стадию и тяжесть инфекции.

Для этой цели дополнительно проводится анализ на антитела к ЦМВ в крови.

Как проводят диагностические тесты с помощью ПЦР

Полимеразная цепная реакция – лабораторный молекулярно-биологический способ обнаружения ДНК бактерий и грибов, ДНК и РНК вирусов. Основа ПЦР – особая ферментативная реакция, протекающая в присутствии специальных ферментов и веществ молекулярной природы. Благодаря тому, что метод способен зафиксировать наличие непосредственно возбудителя болезни, его считают наиболее информативным и чувствительным при выявлении латентных инфекций и носительства по сравнению со всеми другими диагностическими методами.

Анализ биологических образцов с помощью ПЦР-тестирования позволяет быстро обнаружить присутствие самих бактерий и вирусов.

Остальные лабораторные способы диагностики, как правило, определяют косвенные признаки инфекции, либо требуют длительной процедуры проверки.

Основными стадиями ПЦР-методики являются:

  • взятие биологического материала, его доставка в диагностическую лабораторию,
  • выделение генетического материала бактерий и вирусов из взятого материала,
  • непосредственно анализ ПЦР и расшифровка полученных данных.

Для постановки реакции ПЦР используют образцы жидкостей, тканей, секретов, в которых предполагают присутствие болезнетворных микроорганизмов. Чаще всего в качестве образцов для тестирования используют венозную кровь, плазму или сыворотку крови. В лаборатории бактериальные и вирусные частицы отделяют от остальных компонентов и с использованием специальных реагентов выделяют из них молекулы ДНК или РНК.

Полимеразная цепная реакция

На следующей стадии эти генетические молекулы многократно размножают в специальных приборах. Для этого используют особые ферменты и молекулы, которые позволяют искусственно размножить строго определенный вид ДНК, принадлежащий только одному конкретному возбудителю. В результате реакции образуется огромное количество коротких фрагментов ДНК, идентичных тем, что входят в состав вирусов и бактерий.

На третьем этапе накопленные фрагменты обнаруживают с помощью специальных красителей и оборудования для детекции. Если в исходном образце содержались болезнетворные микроорганизмы, в результате реакции образуется специфический продукт, и анализ показывает положительный результат. Если возбудителя в материале не было, продукт реакции не синтезируется и тест дает отрицательный результат.

Метод ПЦР — суть

Именно использование в реакции многократного размножения молекул ДНК строго определенного вида позволяет точно определять наличие микроорганизмов в биологических образцах с предельной чувствительностью. Даже незначительная концентрация инфекционных агентов в тканях и жидкостях организма может привести к синтезу огромного количества продукта реакции и положительному заключению.

Метод петлевой изотермической амплификации, LAMP

Метод петлевой изотермической амплификации, LAMP (от англ.Loop-mediated isothermal amplification) считается упрощенной ПЦР. Производители тест-систем обещают точность метода до 94%.

Во многом метод LAMP схож с ПЦР, за исключением ряда нюансов: праймеров требуется больше, амплификаторов (приборов, периодически изменяющих температуру) не требуется вовсе, как не требуется и электрофореза. РНК вируса также достраивается до ДНК, а дальше копирование идет при постоянной температуре и занимает всего 20-30 минут.

Чтобы увидеть результат, не требуется электрофорез, достаточно просто взглянуть на пробирку. Мутный осадок говорит о том, что в образце обнаружен вирус. Осадок частично состоит из ионов, освобождающихся из «букв»-нуклеотидов во время синтеза ДНК. Если он появляется, значит, ДНК вируса удалось размножить. Многие производители добавляют в свои тест-системы флуоресцентные красители ДНК, чтобы наличие или отсутствие вирусной частицы не вызывало сомнений.

Reuters

Сдача анализа: особенности процедуры и расшифровка результатов

Все пациенты, обследуемые по методу ПЦР, получают наиболее достоверный результат. В данном случае возникновение ошибок практически исключено. Результаты данного анализа готовятся достаточно быстро, что облегчает постановку диагноза и обеспечивает своевременное назначение лечебных мероприятий.

Достоверность результата ПЦР напрямую зависит от правильности сдачи материала на обследование. Материал не должен быть загрязнен, иначе результат исследования не будет объективен. К наиболее важным рекомендациям перед сдачей анализа ПЦР относятся следующие требования:

  1. Запрещено проявлять половую активность за сутки до проведения анализа.
  2. Анализ крови на инфекции необходимо сдавать на голодный желудок в утреннее время.
  3. Моча сдается утром в стерильный контейнер.

Результат анализа будет готов через 1,5-2 суток после проведения рассматриваемой процедуры. Встречаются такие ситуации, когда результат может быть подготовлен в тот же день.

Расшифровка результатов

Результат данного вида обследования может быть положительным и отрицательным. Отрицательный результат анализа крови говорит о том, что инфекционных элементов в сданном материале нет. Большое количество проведенных анализов ПЦР показывает отрицательный анализ.

Положительный анализ ПЦР подтверждает тот факт, что в сданном материале обнаружены инфекционные агенты и необходимо качественное, максимально эффективное лечение больного.

Результат может быть положительным, но какие-либо проявления заболевания отсутствуют. Это говорит или о начале заболевания, или о его носительстве. Если выявлено носительство болезни, то никакие лечебные мероприятия не требуются. Просто необходимо наблюдаться у специалиста. Примерами таких заболеваний являются:

  • папилломавирусная инфекция;
  • герпес и др.

Обычно их обнаруживают в слюне, соскобе из цервикального канала, уретре. Однако необходимо помнить, что больной человек может заразить абсолютно здоровых, несмотря на то, что его данная болезнь никак не беспокоит. Заболевание может перейти в хроническую форму. Следует отметить, что в тех случаях, когда ПЦР анализ крови показал положительный результат, назначение лечебных мероприятий просто необходимо.

Анализ ПЦР имеет еще и количественную характеристику. Количественный результат оценивает только специалист, он индивидуален для разных инфекций. Основываясь на количественной характеристике, врач способен понять, насколько активен данный патологический процесс, поставить точную стадию развития конкретного заболевания. Благодаря анализированию полученных результатов специалист может выбрать необходимый препарат и, возможно, пересмотреть дозировку препарата.

Точность ПЦР диагностики

Специалистам дают ПЦР 3 важнейших характеристики, среди которых выделяют:

  1. Точность.
  2. Специфичность.
  3. Чувствительность.

Диагностика инфекций методом ПЦР имеет большую вероятность обнаружения инфекционных агентов. ПЦР анализ крови и других жидкостей высокоспецифичен. С его помощью можно легко выявить конкретный инфекционный процесс. Диагностика ПЦР обладает высокой чувствительностью. Если в исследуемом материале содержится минимальное количество инфекционных агентов, метод ПЦР будет всегда положителен.

Наиболее редко бывает ложноположительный результат. Если инфекции нет, то и результат отрицателен.

Внутриутробные патологии

С помощью ПЦР диагностики стали доступными исследования внутриутробного развития ребенка. Особую опасность здоровью плода представляет микоплазма и хламидии.

Перед планированием беременности женщина обязана сдать анализы и на другие виды инфекций — краснуха, токсоплазма, гепатит, вирус герпеса. После выявления наличия перечисленных вирусов, необходимо пройти терапевтическое лечение.

Мазок беременной способен дать информацию о наличии урогенитальной инфекции в родовых путях, своевременное устранение которой защитит малыша от заражения.

Забор выделений на мазок производят в любое удобное время при посещении женщиной гинеколога, специальной подготовки для этого не требуется.

После рождения у младенца тоже берут мазок на предмет выявления инфекции. У малышей берут соскоб с задней стенки гортани и слизь с конъюнктивы, мочу или слюну.

Показания к диагностике в первых триместрах беременности:

  • различные виды патологи беременности;
  • подозрение на хроническую форму инфекции;
  • обострение половых инфекций;
  • выявление чувствительности организма к некоторым медикаментам;
  • наличие инфекционного заболевания крови.

Большую опасность представляет не сдача анализов, а не выявленная инфекция, которая может причинить вред здоровью плода. Полимеразная цепная реакция сможет определить наличие скрытой инфекции, которая легко передается плоду через плаценту.

Часто скрытое протекание инфекционного заболевания принимают за общее недомогание беременной, ввязанное с особенностью положения

Важно в первые 12 недель пройти обследование и выявить скрытые патологии. Повторную диагностику проводят уже после назначенного курса терапии

Что нужно для обследования беременной:

  • не использовать спринцевание и вагинальные суппозитории за три дня до диагностики;
  • не иметь половых контактов за три дня до забора биоматериалов;
  • последнее посещение туалета должно быть не позднее трех часов до забора мазка с шейки матки.

Если на анализ сдается кровь, нельзя употреблять сладкое накануне диагностики. Также запрещен прием любых медицинских препаратов внутрь и снаружи. Однако чаще для исследования проводят забор мазка из шейки матки.

Какие гормональные препараты вы принимали для стимуляции овуляции?

Poll Options are limited because JavaScript is disabled in your browser.

Рейтинг автора
5
Материал подготовил
Максим Иванов
Наш эксперт
Написано статей
129
Ссылка на основную публикацию
Похожие публикации