Андрей Смирнов
Время чтения: ~5 мин.
Просмотров: 1

Мазок изо рта

Ход анализа полимеразной цепной реакции

Анализ ПЦР происходит в 4 основных этапа:

  • подготовка материала к копированию;
  • объединение фрагмента ДНК и праймера;
  • копирование генетического набора исследуемого материала;
  • идентификация и оценка полученного ДНК-набора.

Этап 1

Образец подогревают до температуры 94-98°C в специальном приборе — амплификаторе, который программируется на выдерживание точных температур с низкой погрешностью. Заданная температура держится на протяжении минуты-двух. Это необходимо для денатурации ДНК, чтобы двойная спираль разошлась на две отдельные цепочки.

Этап 2

Температура в амплификаторе понижается до 72-75°C для того, чтобы праймер смог распознать сходный с ним участок ДНК-цепи и объединиться с ним.

Праймеры — это специальные реагенты, которые подходят только к одному виду возбудителя. Если необходимо провести анализ на несколько патогенов, то в образец добавляют необходимое количество праймеров.

На этой стадии ДНК реплицирует свою матрицу, используя праймер.

Возможности лаборатории ограничены наличием праймеров для определенных микроорганизмов, поэтому диапазон возможностей определяется наличием таких образцов.

Этап 3

В этом отрезке происходит увеличение генетического материала возбудителя. К праймеру с матрицей приближается фермент и воспроизводит новую цепь ДНК, идентичную той, которая содержалась в первоначальной цепочке.

Когда синтез окончен, завершается один полный цикл полимеразной цепной реакции. По времени он продолжается в среднем до 3 минут. За это время происходит удваивание материала. Дальнейшее увеличение количества цепочек происходит в геометрической прогрессии, и к окончанию анализа успевает пройти 50-80 циклов.

Этап 4

Этап, требующий внимательности и особой тщательности со стороны персонала.

Определение микроорганизма происходит с использованием электрофореза или меток, наносимых окраской. При использовании электрофореза определяющим моментом становится длина фрагментов ДНК, а при использовании меток — развитие окраски в ходе ферментативной реакции.

Стоимость исследования

Клиника «ПрофМедлаб» предлагает несколько видов тестов на антитела к COVID-19:

  • Количественное определение иммуноглобулинов класса G. Анализ позволяет понять, переболел ли человек коронавирусной инфекцией или нет. Стоимость исследования — 3200 рублей. Материал для исследования — венозная кровь. Сроки — 24 часа.
  • Количественное определение иммуноглобулинов класса G и М. Мы рекомендуем сочетать его с ПЦР с целью получения максимально объективной информации. Стоимость исследования — 3900 рублей. Материал для исследования — венозная кровь. Сроки — 2–3 дня.
  • Экспресс тест SARS-CoV-2 Antibody Test. Можно провести самостоятельно в домашних условиях или у нас в клинике, после чего проконсультироваться с врачом. Стоимость экспресс-теста — 2900 рублей. Материал для исследования — капиллярная кровь (из пальца). Результат будет готов через 20 минут.

Срок готовности исследования — от 1 дня с момента забора материала. Цены на эти и другие виды анализов представлены в таблице:

Наименование услугиЦена исследования*, руб.
Количественный анализ на антитела IgG к коронавирусной инфекции SARS-Co-V-2 с применением ИФА (анализ крови), в клинике3200
Определение антител IgM и IgG к коронавирусной инфекции SARS-Co-V-2 с применением ИФА (анализ крови), в клинике3900
Экспресс-тест SARS-CoV-2 Antibody Test (кровь), результат через 20 минут2900
ПЦР-анализ к коронавирусной инфекции SARS-Co-V-2 (мазок), в клинике2400
ПЦР-анализ к коронавирусной инфекции SARS-Co-V-2 (мазок) + выезд на дом ЦАО3500
ПЦР-анализ к коронавирусной инфекции SARS-Co-V-2 (мазок) + выезд на дом в пределах МКАД5500
ПЦР-анализ к коронавирусной инфекции SARS-Co-V-2 (мазок) + выезд до 35 км от МКАД7000
Определение антител IgG к коронавирусной инфекции SARS-Co-V-2 с применением ИФА (анализ крови) — выезд до 10 человек3900
Определение антител IgG к коронавирусной инфекции SARS-Co-V-2 с применением ИФА (анализ крови) — выезд 10-30 человек3500
Определение антител IgG к коронавирусной инфекции SARS-Co-V-2 с применением ИФА (анализ крови) — выезд 30-75 человек3200
Определение антител IgG к коронавирусной инфекции SARS-Co-V-2 с применением ИФА (анализ крови) — выезд 75-150 человек3000
*на анализы SARS-Co-V-2 для физических лиц скидки и акции не распространяются 

Основа ПЦР

Процедура диагностики проводится только в лабораторных условиях с применением специальных ферментов, которые способствуют увеличению структуры РНК и ДНК пациента в несколько раз. Иными словами, число РНК и ДНК достигает уровня, по которому можно делать анализ визуально. В период проведения обследования проводится процесс копирования участка ДНК или РНК, который с максимальной точностью подходит под определенные условия.

Каждая лаборатория, работающая с этим типом диагностики, обладает специальной базой данных, которая позволяет точно определить наличие того или иного инфекционного агента.

Количество лабораторий, которые предлагают подобного рода методику, с каждым днем увеличивается, что позволяет диагностировать каждого желающего. Метод ПЦР позволяет не только определить наличие возбудителя, но и максимально точно подсчитать его количественное соотношение.

Среди новшеств, которые предлагает диагностика, стоит отметить возможность определения отцовства, соединение определенных участков ДНК, введение мутаций и др.

Как расшифровать ПЦР анализ

Проведение ПЦР исследования позволяет не просто установить тип инфекции, присутствующий в организме больного, но и оценить его с количественной точки зрения (количество микробов). Расшифровка результатов количественного анализа ПЦР играет важную роль в обнаружении и проверке эффективности лечения большого числа хронических заболеваний, скажем гепатита C.

Результатом анализа ПЦР могут стать положительный и отрицательный ответы.

  • Отрицательный результат. Следы инфекции не были выявлены в биологическом материале, который являлся объектом исследования в процессе анализа ПЦР. Как правило, на основании отрицательного результата можно полагать, что в организме действительно отсутствует инфекция.
  • Положительный результат. Такой результат анализа ПЦР свидетельствует о том, что следы инфекционного заболевания присутствуют в биологическом материале пациента. Положительный результат анализа ПЦР характеризуется большой степенью точности.

Иногда инфицирование выявляется на фоне полного здоровья и отсутствия признаков заболевания. Некоторые больные считают, что анализ сделан неправильно, но реальная ситуация другая. Если ПЦР показала, что возбудитель в организме есть, значит, он там действительно находится. Просто инфекционные болезни никогда не начинаются сразу после заражения, имея инкубационный период различной продолжительности.Скрытый период может продолжаться очень долго, например, при СПИДе – несколько лет, пока какие-то механизмы не подтолкнут вирусы к размножению. Возбудитель определяется в организме носителей и тех, кто не долечился. Очень часто переходят в скрытую (латентную) форму различные ЗППП. В этом случае может понадобиться дополнительная лабораторная диагностика.

Рейтинг автора
5
Материал подготовил
Максим Иванов
Наш эксперт
Написано статей
129
Ссылка на основную публикацию
Похожие публикации