Правила выполнения и расшифровка антибиотикограммы

Виды посевов мочи

Условно посевы урины можно разделить на два вида:

На тип микрофлоры . Подразумевается, что кроме обнаружения бактериурии, определяется наличие патогенных простейших и грибков (например, Trichomonas vaginalis, хламидии, грибки рода Candida). Лаборант выделяет осадок мочи и производит микроскопию материала. В случае выявления патогенной флоры, культуру бактерий выделяют путем посева мазка на питательную среду. Как только колония микроорганизмов достигает количества, достаточного для исследования, лаборант делает выводы о виде бактериальной флоры.

На чувствительность к антибиотикам

Этот вид исследования имеет важное значение при установлении метода лечения и корректировке антибиотикотерапии. Суть метода — посев материала в специальную лабораторную посуду, разделенную на несколько секторов с определенным видом антибиотика

Лаборант наблюдает за развитием колоний: в секторе, где не наблюдается рост бактерий, находится антибиотик, подходящий для лечения пациента, в тех секторах, где, напротив, обнаруживается бурный рост — они резистентны, т. е. нечувствительны к лекарству.

Анализ на посев мочи с определением чувствительности к антибиотикам

С целью выявления патогенной микрофлоры, обуславливающей развитие инфекционно-воспалительных процессов и обеспечения эффективного лечения, находит применение рутинный анализ, заключающийся в бактериологическом посеве мочи, с помощью которого определяется также чувствительность к антибиотикам.Бактериологическое исследование относится к микробиологическим методам анализа и заключается в посеве образцов мочи на питательную среду, необходимую для роста бактериальной микрофлоры.Анализ проводится для оценки качественного и количественного состава микроорганизмов, прежде всего, патогенных, а также условно-патогенных при содержании их в концентрациях, способствующих развитию инфекционных заболеваний мочеполовой системы.Параллельно производится оценка чувствительности выявленных культур патогенных микроорганизмов к препаратам, относящимся к группе антибиотиков, выражающаяся в составлении антибиотикограммы.

Показания к анализу

• идентификация возбудителей инфекционных заболеваний мочеполовой системы, в том числе в случаях нетипичного протекания болезни;
• адекватный подбор лекарственных препаратов из ряда антибиотиков;
• оценка эффективности лечения, замены лекарства при наличии устойчивости к тому или иному препарату;
• проведение плановых проверок в программе ведения беременности;
• проверки у пациентов при длительной катетеризации.

Подготовка к исследованию

Подготовка к анализу заключается в соблюдении целого ряда требований:

• во временном прекращении приема мочегонных лекарственных препаратов в соответствии с рекомендациями врача;
• до начала курса лечения при назначении препаратов, относящихся к антибиотикам, антисептикам, противогрибковым препаратам;
• в выполнении гигиенических процедур, предшествующих сдаче мочи;
• для анализа пригодны образцы мочи, собранные после, как минимум, двух часов воздержания от опорожнения мочевого пузыря, представляющие среднюю порцию мочи;
• сбор мочи производится в стерильный сосуд с крышкой, обеспечивающей плотное его закрывание;
• время хранения материала — максимум два часа до начала собственно использования для анализа;
• образцы мочи могут быть получены с помощью катетера.

Результаты и их интерпретация

Результаты анализа выдаются обследуемому в виде бланка с указанием:

• перечня вошедших в анализ микроорганизмов и данных значений титра для каждого из них, выраженных в КОЕ на 1 мл пробы;
• наличия либо отсутствия роста — для каждого вида;
• степень чувствительности микробных культур к вошедшим в исследование антибиотикам, выраженной в терминах «чувствительный», «устойчивый», «умеренно-устойчивый».

Пределы референтных значений:

• титр меньше 10*2 – бактериурия низкая;
• значения титра в пределах 10*3 — 10*4 –бактериурия средняя; 
• значения титра, превышающие 10*4, соответствуют высокой степени бактериурии; лишь в этом случае производится оценка чувствительности по отношению к антибиотику.

Интерпретация:

• норма — отсутствие роста патогенной микрофлоры;
• при выявлении более одного вида патогенных микроорганизмов — возможная контаминация образца, необходимость повторного прохождения анализа;
• выявление клинически значимой бактериурии — при значениях, превышающих 10*4.

Соблюдение необходимых требований к сдаче материала для анализа — залог получения достоверных значимых результатов, важных как с точки зрения диагностики заболевания, так и выбора адекватного лечения.

Забор материала для антибиотикограммы

например, гнойДля проведения антибиотикограммы могут быть использованы:

• кровь;
• мокрота;
• моча;
• каловые массы;
• сперма;
• спинномозговая жидкость;
• мазки со слизистых оболочек;
• участки омертвевших тканей;
• гнойные выделения и так далее.

Подготовка к забору анализов на антибиотикограмму

При заборе материала для антибиотикограммы следует:

• Строго соблюдать условия стерильности. Забор материала должен проводиться в стерильных условиях и стерильными (обеззараженными) инструментами. Любой контакт биологического материала с посторонними предметами (в том числе с руками медсестры) или с воздухом из окружающей среды может исказить результаты антибиотикограммы. Дело в том, что в окружающем нас воздухе и абсолютно на всех окружающих предметах имеется множество различных бактерий. При контакте с исследуемым материалом они непременно попадут в него, вследствие чего во время проведения исследования могут быть выявлены врачом-лаборантом даже в том случае, если изначально материал (кровь, моча и так далее) был стерилен и не содержал возбудителей инфекции. Это приведет к ложноположительному результату исследования и может стать причиной ненужного или неэффективного лечения.
• Производить забор материала до начала лечения антибиотиками. Как было сказано ранее, целью антибиотикограммы является определить чувствительность бактерий к определенным антибиотикам. Если материал для исследования будет набран после того как пациент начнет получать антибиотики, рост и активность бактерий могут значительно снизиться (из-за антибактериального действия принимаемых препаратов), вследствие чего провести исследование не получится. Следовательно, забор материала рекомендуется проводить до назначения какого-либо антибиотика. Исключением могут быть случаи, когда на фоне длительного лечения антибиотиками состояние пациента не улучшается, что может свидетельствовать об устойчивости возбудителя инфекции к используемым препаратам. В подобных ситуациях забор материала можно проводить даже на фоне лечения антибиотиками.

Забор крови

кроме той, что была указана вышечто облегчит забор кровимаска предотвратит попадание бактерий из дыхательных путей медсестры на кожу пациента во время забора крови

на место прокола при этом прикладывается ватный шарик, смоченный в спирте

Забор мокроты

например, при кашлев течение 3 минутплевательницупри возможности ее следует откашливать прямо в плевательницукоторая стерильнакогда она открытабронхоскопии

Забор мочи

баночкумочевом пузыремыло, гель для душабез использования мыла или других гигиенических средствпервые 2 секунды от начала мочеиспускания

Забор кала

Подготовка к забору кала включает:

• Гигиену промежности и анальной области. Перед забором материала следует выполнить гигиенические мероприятия, используя мыло или гель для душа. В конце следует тщательно смыть гигиеническое средство с кожи и анальной области большим количеством теплой воды, так как его попадание в каловые массы может исказить результаты исследования.
• Опорожнение мочевого пузыря. Акт дефекации в норме сопровождается и мочеиспусканием. Однако если в каловые массы попадет моча, это может исказить результаты исследования (например, содержащиеся в моче бактерии могут попасть в набранный материал).

кишечникесли ее нет, можно использовать стерильные ушные палочки или стерильный бинт, который следует намотать на любую палочку в несколько слоев

Забор спинномозговой жидкости

СМЖпозвоночникене содержит бактерийпункциюреаниматолог, инфекционист, неврологкожувыделяется она медленно, примерно по 1 капле в секунду

Показатели и нормы

В норме моча стерильна, однако, допускается небольшое количество представителей симбиотической микрофлоры. Обнаружение микроорганизмов в биоматериале в количестве более 103 КОЕ свидетельствует о развитии инфекционных процессов в организме человека. В случае обнаружения роста микрофлоры при посеве мочи сначала проводится идентификация чистой культуры до вида, реже – до рода. Далее, по стандартной методике проводится тест по определению чувствительности выделенных штаммов к различным группам антибиотиков. Проведение теста необходимо для подбора эффективного курса антибиотикотерапии.

Важно: методика посева мочи на стерильность исключает возможность диагностики наличия анаэробной микрофлоры, так как для её культивирования требуются специальные условия. Диагностирование присутствия строгих анаэробов проводится при помощи ПЦР методов

Что нужно учитывать при сдаче стерильного анализа

Данный вид лабораторной диагностики требует соблюдения 2 основных правил: стерильности и проведение анализа строго до начала приёма антибактериальных или противогрибковых препаратов.

Правила асептики должны неукоснительно соблюдаться не только при самостоятельном сборе мочи пациентом, но и в лаборатории: пробирки, пипетки, чашки Петри, а также все расходные материалы должны предварительно проходить процедуру стерилизации. Кроме того, предшествующий курс антибиотикотерапии может приводить к получению недостоверных ложноотрицательных результатов.

Информацию о том – как необходимо собрать мочу и о правилах подготовки можно получить в лаборатории или у врача, который направляет на исследование.

Расшифровка анализа мочи на стерильность

Анализ проводится несколько дней и может составлять в среднем неделю. Расшифровку анализов и составление курса терапии должен проводить лечащий врач. Референсные значения для данного вида исследования не приводятся. Самостоятельный подбор лекарств может быть не только неэффективным, но и небезопасным для здоровья человека.

В каждом результате указывается вид выделенного штамма, а также перечень антибиотиков и диаметр зон задержки роста ими. Чем больше диаметр, тем большую чувствительность проявляет культура микроорганизмов к антибактериальному препарату. Именно эти антибиотики являются препаратами выбора. Количество выросших микроорганизмов указывается в КОЕ – колониеобразующие единицы, что показывает, как много бактерий выросло на чашке Петри. Как правило, это значение возводится в степень для удобства, например, 3*103 КОЕ.

Нормы для здоровых женщин и мужчин

Нормальный анализ предполагает абсолютное отсутствие роста представителей условно-патогенной и патогенной микрофлоры или их количество до 100 КОЕ как у мужчин, так и у женщин. Выделение какой-либо культуры микроорганизмов свидетельствует о развитии инфекционного процесса в организме человека. При этом необходимо помнить, что в случае диагностики заболевания бактериальной или грибковой природы предполагает лечение одновременно обоих партнёров.

Расшифровка результата у беременных

Интерпретация результатов анализа у беременных должна проводиться исключительно лечащим врачом. Особого внимания требует подход к выбору антибактериальных препаратов, при необходимости лечения. Известно, что многие антибиотики могут проникать сквозь плаценту. При этом отсутствует достоверная информация о безопасности их влияния на внутриутробное развитие плода.

Отсутствие роста – показатель здоровья женщины и нормального течения беременности. В случае наличия роста микрофлоры требуется подсчёт КОЕ, выделение чистой культуры с последующей идентификацией. Острая форма бактериальной инфекции требует срочного медикаментозного лечения, однако, при возможности желательно избегать антибиотикотерапии.

Расшифровка анализа у ребенка

Расшифровка результатов посева мочи на стерильность у детей аналогично таковому у взрослых: моча должна быть стерильна или содержать менее 103 КОЕ представителей индигенной микрофлоры. Требуется обязательная идентификация выделенной микрофлоры до вида.

Исходя из того, что многие антибиотики имеют возрастные ограничения, определение чувствительности выделенных патогенных штаммов следует вести непосредственно с учётом этого правила. Сначала осуществляется подбор антибиотиков, которые можно было бы назначить ребёнку, а затем уже проводится тест на чувствительность.

Расшифровка

Бактериологический посев на чувствительность к антибиотику дает представление о качественной и количественной оценке исследуемого образца. Качественная оценка (наличие возбудителя) классифицируется по следующим четырем степеням роста:

1. Первая. При этой степени рост на твердой среде отсутствует, на жидкой регистрируется небольшой рост.
2. Вторая. Небольшой рост на твердой среде (до 10 колоний).
3. Третья. Значительный рост на твердой среде (10-100 колоний).
4. Четвертая. Больше 100 колоний.

При обнаружении в результате исследования условно-патогенной микрофлоры (непатогенных грамотрицательных бактерий) первые две степени относят к норме, при третьей или четвертой степени говорят о присутствии в организме микробов-возбудителей инфекции, размножение которых стало причиной возникновения и развития заболевания. При наличии в материале патогенной микрофлоры все четыре степени свидетельствуют о наличии болезни. Например, сапрофитная микрофлора в бакпосеве мочи свидетельствует об инфекции мочеполовой системы.

Количественная оценка проводится в колониеобразующих единицах (КОЕ), обозначающих объединение (сообщество) клеток бактерий, образовавших колонию. Она помогает установить степень обсемененности и проконтролировать достаточность назначенных для лечения дозировок лекарственных средств (адекватность проведенных медикаментозных назначений). Принято следующее условное соотношение КОЕ и миллилитров:

• 1 колония – это 103 КОЕ/мл.
• 1-5 колоний – это 104 КОЕ/мл.
• 5-15 колоний – это 105 КОЕ/мл.
• более 15 колоний – это 106 КОЕ/мл

Тест на чувствительность к антибиотикам, проводимый одновременно с посевом на определение возбудителя инфекции, называют антибиотикограммой. Выделив патогенный микроорганизм, его пересаживают в благоприятную для роста среду, где исследуется резистентность (чувствительность) конкретного штамма к активным компонентам антибактериальных препаратов. Чувствительные к антибиотику патогенные клетки не растут в зоне его действия, устойчивые показывают рост колоний.

Распространенным методом проведения антибиотикограммы является метод диффузии смоченных в антибактериальном препарате бумажных полосок в чашке Петри с исследуемой средой. Их выкладывают по поверхности, отступая на два сантиметра от края чашки и от друг друга. После 5-7 часов при комнатной температуре чашу помещают в термостат на срок от 3 до 5 дней. По результатам исследования рост колоний оценивается следующим образом:

• Кольцо вокруг полоски диаметром от 2,5 см говорит о повышенной чувствительности микрофлоры к препарату;
• 2,5-1,5 см – стандартная чувствительность (средняя клиническая эффективность).
• до 1,5 см – слабая реакция, лечение с высокой вероятностью не будет эффективным.
• Отсутствие задержки роста колонии – полная устойчивость к медикаментозному средству.

источник