Андрей Смирнов
Время чтения: ~14 мин.
Просмотров: 2

Насколько эффективен анализ мокроты на туберкулез методом пцр?

1.104. Стандарт «Сбор мокроты для бактериоскопического исследования на туберкулез, в условиях стационара».

Цель:
обнаружение микобактерий туберкулеза,
научить пациента самостоятельнособратьмокроту.

Показание: заболевания
органовдыхания

Приготовьте:

— при
плевательницы многоразовыеилиодноразовые
или контейнерыс герметично
завинчивающимися крышками;
— чистую
сухую широкогорлую банку из прозрачного
стекла 50 – 200 мл с крышкой;
— напишите
и наклейте направление
(
ФИО пациента,
год рождения,
дата забора идентификационный номер
пациента, направление ф. ТБ – 0,5)

Алгоритм действия:
1.
Проведите инструктаж с пациентом о
правилах сбора мокроты на исследование

2.
Проводите забор мокроты в отсутствие
посторонних лиц на открытом воздухе,
либоа специально
отведеннойдля этих
целей отдельной комнате, хорошо
проветриваемой, с
открывающимися
окнами, с
наличием вытяжной вентиляциии кварцевой
лампы.
3.
Наденьте маску,
клеенчатыйфартук,
резиновыеперчатки.

4.
Собирайте
мокроту рано утром до приема пищи 3дня подряд.Выдайте
пациент открытую плевательницу или
контейнер.
5. Попросите пациента
почистить зубы и прополоскать полость
рта и зев водой или раствором соды.
6.
Встаньте за
спиной пациента и попросите его поднести
ко рту плевательницу или контейнер.

7.
Попросите пациента накрыть рот платком
или тканью и сделать 3 глубоких вдоха
и выдоха и в конце сильно откашлянуться
и сплюнуть мокроту в количестве3-5
мл вплевательницу
или контейнер, некасаясь ее
краев.
8. Закройте плевательницу
(контейнер) крышкой.
9.Осмотрите
мокроту убедитесь, что мокрота содержит
плотные гнойные частицы, а не слюну.

10.Отправьте
собранную утреннюю пробумокроты в
лабораторию в течение суток.

11. Оформите бланк направление Ф.
ТБ-05.

Примечание:
при сборе
мокроты для бактериоскопического
исследования в условиях поликлиники,
амбулатории. ФАПа мокроту собирают
согласно выше описанных правил.
Особенностью сбора мокроты вне стационара
является сбор мокроты в два приема.

Первая проба мокроты собирается при
обращении пациента в поликлинику утром
под наблюдением медработника.
Вторая
проба – утром следующего днядома и
доставляется в лабораторию.
Третьяпробасобирается
пациентом в этот же день в поликлинике
под

наблюдением
медработника (т.е. 2-3 пробы собираются
в один день).


сбор мокроты проводится обязательно
под контролем медработника.

многоразовые плевательницы и контейнеры
подлежат дезинфекции и стерилизации.

— одноразовые плевательницы после
использования подлежат уничтожению

Алгоритм выполнения сбора мокроты на КУМ

СБОР МОКРОТЫ НА КУМ (кислотоустойчивые микобактерии)

Технология выполнения простой медицинской услуги

Цель: Диагностическая.

Показания:

7. Подозрение на туберкулез легких.

8. Кашель более 3 недель.

Противопоказания:отсутствие мокроты.

Оснащение:

1. 3 контейнера для сбора мокроты объемом 50 мл с широким горлышком (примерно 35 мм в диаметре), изготовленный из прозрачного материала с плотно закрывающейся крышкой (одноразовые или многоразовые).

2. Маркер.

3. Халат, шапочка, респиратор.

4. Резиновые перчатки.

5. Направление № 05-ТБ/у.

6. Бикс или специальный ящик с гнездами для транспортировки.

7. Сопроводительный лист доставки диагностического материала для микроскопических исследований на туберкулез (№04-2-ТБ/у)

8. Мыло и полотенце.

I Подготовка к процедуре:

1. Представиться пациенту, объяснить ход и цель процедуры:

а) для анализа мокроты на КУМ собирают 3 образца мокроты в течение 2 дней согласно следующему графику:

– 1 образец мокроты собирают во время первого визита пациента с подозрением на туберкулез (первый день) в специально оборудованном кабинете

– 2 образец мокроты собирают утром дома, до прихода на прием к врачу (второй день) и как можно скорее следует доставить собранный образец в медицинское учреждение.

– 3 образец мокроты собирают на второй день, когда пациент приходит на прием к врачу со вторым образцом мокроты.

б) накануне вечером, перед сбором утреннего образца мокроты, необходимо почистить зубы. Собирать утренний образец мокроты необходимо до утренней чистки зубов и приема пищи.

в) перед сбором образцов мокроты во время приема у врача следует прополоскать рот, чтобы удалить из полости рта остатки пищи, но не чистить зубы.

г) в домашних условиях мокроту лучше собирать на открытом воздухе. Если Вы собираете мокроту в помещении, то нужно это делать перед открытым окном/ форточкой в отсутствие других людей.

д) в ЛПУ образцы мокроты собираются под наблюдением медицинского работника.

3.Предложить пациенту пройти в специально оборудованную комнату с хорошей вентиляцией (если такой комнаты нет, то сбор мокроты следует проводить вне помещения, на открытом воздухе или перед открытым окном)

II Выполнение процедуры:

4. Надеть респиратор и резиновые перчатки.

5. На внешней стороне контейнера (не на крышке) написать номер образца мокроты (№1)

6. Проинформировать пациента о дальнейших действиях:

– необходимо сделать два глубоких вдоха, задерживая дыхание на несколько секунд после каждого вдоха и медленно выдыхая;

– затем вдохнуть в третий раз и с силой выдохнуть воздух;

– еще раз вдохнуть и резко откашляться;

– поднести контейнер как можно ближе ко рту и осторожно отхаркнуть в него мокроту (объяснить, что нельзя глотать мокроту и необходимо избегать загрязнения контейнера с внешней стороны);

– плотно закрыть контейнер крышкой;

– вымыть руки с мылом.

7. Встать позади и сбоку от пациента и наблюдать за сбором мокроты (по возможности медицинский работник должен покинуть комнату и наблюдать за сбором мокроты через стеклянное окно в двери).

III Окончание процедуры:

8. Поместить контейнер №1 в специальный ящик для транспортировки.

9. Снять перчатки, вымыть руки с мылом.

10. Промаркировать и выдать 2 контейнер для сбора утренней мокроты дома.

11. Доставить анализы мокроты в лабораторию.

13. Полученный результат подклеить в медицинскую документацию.

Примечание:

· Если первая попытка сбора мокроты оказалась неудачной (головокружение у пациента, пациент сумел собрать только слюну, мокроты оказалось недостаточно для исследования), то в этом случае следует повторить сбор мокроты позже.

· В условиях стационара ОПТД можно собирать 3 образца мокроты в течение трех дней, утром до приема пищи.

· Если пациент не может придти в медучреждение, то медработник может собрать мокроту на дому у пациента.

· В некоторых случаях возможен следующий график: 1 образец должен быть собран, как только пациент приходит на прием к врачу, затем пациента направляют на рентгенологическое исследование, после чего собирают 2 образец мокроты. Перед уходом пациенту выдают контейнер для сбора мокроты утром следующего дня.

Стоимость анализа в разных центрах

Ниже можно ознакомиться с информацией о том, какие приблизительные цены на ПЦР мочи в медицинских лабораториях. Для сравнения представляем три популярных учреждения.

Наименование медицинского центраАдресСтоимость анализа
Инвитрог. Москва, Алексеевский, Кулаков переулок, 13365 рублей
Медлайн-сервисг. Москва, Пятницкое шоссе, д. 41390 рублей
Центр Росаг. Москва, улица Гвоздева, д. 5564 рубля

Из вышеописанного можно сделать вывод, что стоимость на анализ не превышает 400 рублей. Такая сумма не может остановить больного при необходимости подтверждения диагноза.

Имейте в виду! Иногда в клиниках присутствуют акции и скидки. Следить за ними можно на сайтах лабораторий, узнать в телефонном режиме или не ресепшене в самом офисе.

Как правильно собрать биоматериал

Корректность результатов и эффективность дальнейшего лечения зависят не только от правильности проведения исследования, но и от корректного сбора материалов для него.

 Основные правила по сбору мокроты для исследования

  1. Откашливать нужно не слюну и слизь из носоглотки, а содержимое нижних отделов органов дыхания.
  2. Чтобы получить продуктивный кашель, следует предварительно сделать 2-3 глубоких вдоха, стараясь дышать так, чтобы легкие полностью наполнялись воздухом и раскрывались.
  3. Контейнер для сбора материала обследуемый должен держать как можно ближе ко рту и сразу же сплевывать в него то, что откашлялось.
  4. Если не получается получить мокроту, то выполняются следующие манипуляции: обследуемый должен несколько раз постучать себя по груди, глубоко подышать, каждый раз задерживая дыхание на несколько секунд. В крайнем случае предлагается подышать над емкостью с горячей водой с добавлением пищевой соды.

К контейнеру для сбора материалов для анализа тоже предъявляются особые требования. Посуда не обязательно должна стерилизоваться. Но она должна быть чистой, сухой, из пластика или стекла, с плотно завинчивающейся крышкой.

Виды исследования мокроты на КУМ

Туберкулезные палочки в мокроте при отхаркивании обнаруживают, используя различные методы исследования мокроты.

Бактериоскопическое исследование мокроты

Этот вид исследования называют также методом окраски по Цилю-Нильсену, он является основным при постановке диагноза туберкулезной инфекции. Проводится анализ следующим образом:

  • мокрота обрабатывается карболовым фуксином;
  • далее биоматериал обесцвечивается раствором серной кислоты 5% или раствором солянокислого спирта 3%;
  • докрашивание осуществляется раствором метиленового синего 0,25%.

Для оценки окрашенных материалов используется прибор, оснащенный иммерсионной системой. Кислотоустойчивые микобактерии будут приобретать красный цвет, а фон вокруг них – синий.

Осматриваются стандартно 100 полей зрения: если КУМ присутствуют в мокроте, то этого достаточно, чтобы заметить их. Если же КУМ не обнаружены, просматриваются 200 полей зрения. Для получения точных результатов достаточно 1 часа. Но, как правило, пациенты их получают у лечащего врача спустя сутки, то есть, на следующий день.

Преимущества этого метода: доступность, часто проводится бесплатно, оперативность – результаты при желании можно получить сразу же. К недостаткам относится сравнительно невысокая чувствительность.

Люминесцентная микроскопия

Этот метод в сравнении с предыдущим считается на 15-30% эффективнее. Для окрашивания мокроты применяются флюорохромы. Это красители органического происхождения, которые начинают светиться при подсвечивании ультрафиолетовыми, фиолетовыми или синими лучами. Обычно используются аурамин 00 или родамин С.

Для проведения исследования используется люминесцентный прибор. При выявлении кислотоустойчивые микобактерии туберкулеза будут отсвечивать золотистым на темном поле. При таком виде микроскопии можно выявить не только наличие, но и количество КУМ. Это очень важный критерий для того, чтобы определить насколько высокую эпидемическую опасность представляет больной, то есть насколько он заразен, и на какой стадии находится болезнь.

Существует специальная таблица для расшифровки результатов окрашивания и подсвечивания мокрот по этому методу.

Интерпретация результатов

  1. КУМ не выявлены в 300 полях зрения – отрицательный.
  2. От 1 до 9 КУМ в 100 полях зрения – положительный.
  3. От 10 до 99 КУМ в 100 полях зрения – положительный +.
  4. 1-10 КУМ в 1 поле зрения – положительный ++.
  5. Более 10 КУМ в поле зрения – положительный +++.

Бактериологический (культуральный) метод выявления

Этот метод заключается в посеве полученного биоматериала и еще одного патологического материала на питательную среду. Чтобы выявить активные МБТ, достаточно наличия нескольких жизнеспособных клеток в мокротах. Для регистрации роста культуры потребуется от 21 до 90 суток.

Для этого анализа используются три группы питательных сред:

  1. Плотные питательные на основе яйца.
  2. Полужидкие питательные на агаровой основе.
  3. Жидкие синтетические и полусинтетические питательные среды.

На территории РФ используется преимущественно среда Левенштейна-Йенсена. Во всем мире это также стандартная питательная среда для выявления первичного возбудителя туберкулеза и определения его чувствительности к лекарственным препаратам.

Оценка интенсивность роста выявленных МБТ

  1. От 1 до 20 колоний – это + или скудное выделение МБТ.
  2. От 21 до 100 колоний – это ++ или умеренное бактериовыделение.
  3. Свыше 100 колоний – это +++ или обильное бактериовыделение.

Устойчивость микобактерий к лекарственным препаратам устанавливают методом абсолютных концентраций. По их результатам осуществляют подбор антибиотиков для лечения. Это важная особенность метода, позволяющая выбрать для каждого больного индивидуальную и эффективную антибиотикотерапию.

Кроме вышесказанного преимущество метода в чувствительности к возбудителю.  Можно обнаружить не только наличие микобактерии, но также посчитать их количество, установить активность, устойчивость к лекарствам. Большой минус – длительность исследования. С появлением компьютерных технологий обработка результата ускорилась до 3-4 суток.

Сбор материала

Лабораторное исследование мокроты проводится при наличии у больного продуктивного кашля и прочих признаков, позволяющих врачу заподозрить бронхолегочную патологию.

Анализ мокроты показан пациентам с симптомами:

  1. Пневмонии,
  2. Бронхита,
  3. ХОБЛ,
  4. Бронхоэктатической болезни,
  5. Грибкового поражения легких,
  6. Легочного гельминтоза,
  7. Новообразований в органах дыхания,
  8. Интерстициальных болезней легких,
  9. Туберкулеза,
  10. Силикоза,
  11. Коклюша.

Опасные заболевания респираторного тракта — основное показание к назначению анализа мокроты. Специалисты-пульмонологи осматривают горло больного, прослушивают грудную клетку и ставят предварительный диагноз. Исследование отхаркиваемой флегмы необходимо, если:

  • Кашель не проходит более двух недель,
  • Прописанное лечение не приносит облегчения,
  • У больного неблагополучный аллергический анамнез,
  • Имеется наследственная предрасположенность к онкологическим процессам,
  • Пациент лежачий.

Существует специальный алгоритм действий, который необходимо строго выполнять:

  1. Накануне вечером употреблять много жидкости,
  2. Не чистить зубы за час до исследования,
  3. Прополоскать рот непосредственно перед сбором,
  4. Сделать три глубоких медленных вдоха и резко откашляться,
  5. Поднести контейнер к нижней губе и сплюнуть слизь,
  6. Не прикасаться губами к краям емкости,
  7. Плотно закрыть стерильный контейнер с образцом мокроты,
  8. В течение двух часов доставить материал в лабораторию,
  9. Сказать врачу название и дозу всех принимаемых медикаментов.

Если у пациента кашель с трудноотделяемой мокротой, ее необходимо разжижать. Для этого рекомендуют вечером накануне исследования пить много щелочной минеральной воды, теплого чая с молоком. По согласованию с врачом можно использовать отхаркивающие средства. Спровоцировать кашель непосредственно перед сбором поможет десятиминутная содо-солевая ингаляция. Пары раствора способствуют усиленному образованию секрета, раздражению кашлевых рецепторов и беспрепятственному выходу мокроты наружу. При наличии сухого кашля больному рекомендуют лечь на живот, голову свесить ниже туловища и глубоко откашляться. Подобное положение облегчает процесс выведения слизи из легких.

Взрослый человек без труда справиться с процессом сбора флегмы. Гораздо сложнее получить материал от маленьких детей. Им раздражают нервные окончания, расположенные у корня языка, а когда начинаются кашлевые толчки, подносят ко рту открытую чашку Петри, в которую попадает мокрота. Подобную процедуру выполняют в лечебном учреждении. Аналогичным эффектом обладает дренажный массаж. Он помогает собрать мокроту у детей.

Когда сбор материала осуществляется описанным способом, слюна попадает в исследуемый образец во время кашля. Альтернативным методом является забор мокроты с помощью бронхоскопа. Эндоскопия — инвазивная манипуляция, во время которой врач осматривает слизистую оболочку респираторного тракта и при необходимости отбирает секрет для лабораторных испытаний.

Методы исследования биоматериала

Существуют разные методы исследования взятого материала.

Бактериоскопическое исследование

Основной метод выявления МБТ – бактериоскопический. Суть бактериологического исследования – рассмотрение мазка, который был окрашен в определенный цвет. Препараты окрашивают по Цилю-Нильсену. Затем их помещают в иммерсионную среду и рассматривают через микроскоп. Окраска МБТ становится красной, а окружающий фон приобретает синий цвет.

Если при использовании этого метода микобактерии туберкулеза не обнаруживают, пациенту назначают другой анализ – посев в питательных средах.

Бактериологическое исследование

Бактериологическое исследование мокроты производится путем посева сбора в питательную среду. Этот процесс занимает много времени. Метод помимо достоверности диагноза определяет чувствительность «выращенных» бактерий к различным видам антибиотикам. Сбор мокроты на бактериологическое исследование не отличается от метода сбора на клинический анализ.

Перед посевом собранный продукт обрабатывается с целью подавления роста неспецифической микрофлоры. Для выращивания МБТ существуют различные питательные среды. Рост МБТ происходит за длительный период.

Анализ на ВК

При этом анализе обнаруживают специфические бактерии туберкулеза. Сбор мокроты на ВК осуществляется таким же способом, как и на общий анализ.

Исследование на наличие КУМ

Для подтверждения поставленного диагноза проводят исследование биоматериала на наличие кислотоустойчивых микобактерий. Нахождение КУМ в мокроте свидетельствует о наличии туберкулеза.

Процедура взятия мазка

Мазок на флору у женщин берут из уретры, с внутренней части половых губ, слизистой оболочки влагалища и шейки матки. Также можно получить материал для микроскопии из полости матки (при аспирации или выскабливании) и яичников (путем пункции или во время операции). Из этого материала тоже готовятся мазки.

Техника взятия мазка:

Уретра: используется очень тонкий тампон на алюминиевой проволоке или одноразовая бактериологическая петля. Область наружного отверстия мочеиспускательного канала очищают тампоном из марли. Петлю или тампон вводят в уретру на глубину 1-2 см, одновременно слегка надавливая на боковые и заднюю стенки. Полученный материал помещают на предметное стекло путем прокатывания тампона или передвижения петли. Он используется для микроскопии и иммунофлюоресцентного анализа. Чтобы провести культуральное исследование или полимеразную цепную реакцию (ПЦР) тампон или петлю помещают в пробирку с питательной средой.
Преддверие влагалища и половые губы: применяется стерильный тампон. Взятие материала проводится с воспаленного участка. При абсцессе желез преддверия его сначала вскрывают, а затем полученное содержимое переносят на предметное стекло.
Влагалище: с помощью зеркал обнажают нижнюю часть влагалища с шейкой. Тампон помещают на видимый участок воспаления или при его отсутствии – в задний свод влагалища. Материал равномерно переносят на предметное стекло, просушивают на воздухе, закрепляют этанолом (2-3 капли на стекло), маркируют, помещают в закрытую емкость и направляют в лабораторию. При необходимости культурального исследования, например, при трихомониазе, тампон помещают в пробирку и немедленно отправляют лаборанту.
Шейка матки: вначале с помощью ватного тампона берут материал для культурального исследования

Шейку смачивают стерильным физраствором, тампон осторожно вводят в цервикальный канал, а затем извлекают, не касаясь влагалищных стенок, и помещают в стерильную пробирку. Чтобы взять мазок для микроскопии, ПЦР или вирусологического анализа, используется особая щеточка

Ее помещают в цервикальный канал после забора материала на культуральное исследование. Глубина введения составляет 1-2 см, щеточку осторожно вращают, затем полученный соскоб переносят на предметное стекло.

Взятие мазков – быстрая, безболезненная и безопасная процедура.

Материал для анализа

Для исследования выделения из носоглотки в виде слюны и слизи являются непригодными. Поэтому необходимо не отхаркивать, а именно откашливать. Когда происходит отхаркивание, вещество выделяется не из бронхов и легких, а из носоглотки и рта.

Пациенту вручается памятка для подготовки по сбору мокроты, в которой указывается, что для возможности произведения анализа необходимо собрать три-пять миллилитра. Это приблизительно пять-шесть плевков. Оставшуюся часть нельзя проглатывать. Необходимо использовать приготовленную заранее плевательницу.

Сбор материала

Пациенту объясняют, как правильно собрать мокроту для анализа. Чтобы улучшить ее выделение следует выполнить три медленных глубоких вдоха и столько же выдохов. Между вдохом и выдохом надо задерживать дыхание на несколько секунд. Затем надо прокашляться и сплюнуть в баночку. Открывать ее следует только для сплевывания и сразу плотно закрывать.

Эти действия необходимо продолжать до того, как уровень отметки в баночке не достигнет отметки в пять миллилитров. Собирать мокроту надо таким образом, чтобы в емкость не попала слюна.

Если, несмотря на знание правил, как сдавать анализ, попытки оказываются неудачными, можно подышать паром над кастрюлей с горячей водой. Если все происходит в поликлинике, то медперсонал делает пациенту пятнадцать минут ингаляцию с помощью раствора соды и соли. Материалом для исследования в таких случаях могут быть промывные воды бронхов или желудка.

Если невозможность собрать материал связана с перенапряжением, то следует расслабиться, походить по комнате. Расслаблению помогут упражнения, а также легкий массаж грудной клетки.

Как скоро сбор должен быть доставлен в лабораторию?

В домашних условиях баночку с собранным биоматериалом следует сразу поместить в холодильник на три часа, не более. В амбулатории с целью увеличить срок хранения используют средства для консервации.

Рейтинг автора
5
Материал подготовил
Максим Иванов
Наш эксперт
Написано статей
129
Ссылка на основную публикацию
Похожие публикации