Методы количественной оценки форменных элементов крови в моче (метод амбурже, нечипоренко, аддиса-каковского)

Медикаментозная гематурия

Наиболее часто эритроцитурия отмечается при терапии антибактериальными и нестероидными противовоспалительными препаратами, особенно при длительных курсах. Также у достаточного большого количества пациентов было зафиксировано данное состояние при приеме:

• антиагрегантов – ацетилсалициловой кислоты, Дипиридамола, Клопидогрела, Тиклопидина;
• антикоагулянтов – гепарина, и его низкомолекулярных производных (Клексана, Бемипарина, Фрагмина, Фраксипарина);
• тромболитиков – Тенектеплаза, Алтеплаза;
• Реопро (Абциксимаб), Интегрилина (Эптифибатида) и других лекарств, способствующих снижению вязкости крови.

Кроме того, гематурия может определяться при использовании Гентамицина, Пенициллина, сульфаниламидов, препаратов кальция, тиазидных диуретиков, ретиноидов и пиразолонов.

Лекарственные препараты способны стать причиной возникновения гематурии

Органолептические свойства

Сюда входит объем выделяемой жидкости, цвет, запах и пенистость.

Объем

Общий объем мочи, сданный пациентом для клинического исследования, не предоставляет возможности оценить описываемый показатель, поскольку выводы об отклонениях диуреза в таком случае делать сложно. В данном случае с помощью его определяется лишь плотность (удельный вес) урины.

Диурез – это общий объем урины, который образуется за конкретный временной отрезок (суточный или минутный диурез). Суточный диурез здорового человека, как правило, равен 1,5–2 л, что, в свою очередь, составляет 70–80% от выпитой в течение дня жидкости. Увеличение суточного диуреза носит название полиурия, а снижение до 500 мл и меньше – олигурия.

Цвет мочи в норме может колебаться от светлого до насыщенного желтого

Цвет

Цвет урины (в бланке указан английским словом «color») также, как и ее прозрачность, оценивается работником лаборатории на глаз. В идеале оттенок выделяемой жидкости может варьироваться от светло-соломенного до выраженного желтого. Такие колебания напрямую зависят от наличия в выделенной жидкости красящих компонентов – урозеина, уроэритрина, уробилина.

Все остальные изменения цветовой гаммы могут указывать на развитие патологий, к примеру:

• темно-бурый – гепатит, желтуха;
• розовый или красный – присутствие крови;
• серовато-белый оттенок – наличие гнойных примесей;
• черный – алкаптонурия (повышенная экскреция гомогентизиновой кислоты);
• темно-красный – гемолитический криз, порфириновая болезнь, гемоглобинурия;
• синий или зеленый цвет – гнилостные процессы, локализующиеся в кишечнике.

Запах

С одной стороны, запах при проведении общего анализа не несет значительной информации для врача. Это связано с тем, что большинство продуктов питания имеют сильный аромат либо содержат эфирные масла, способные придать ей специфический оттенок.

Но с другой стороны, определенные изменения, улавливаемые обонятельным органом, могут говорить о протекании патологических процессов, таких как:

• аммиачный – цистит;
• экскрементов – кишечная палочка;
• ацетоновый – кетонурия (присутствие кетоновых тел);
• гниющей рыбы – триметиламинурия (скопление триметиламина);
• гнилостный – гангренозные процессы в органах мочевыделительной системы.

Справка! У здоровых людей запах мочи невыраженный, мягкий, иногда несколько специфичный. Когда емкость с собранным биоматериалом остается какое-то время открытой, запах приобретает резкость из-за происходящего окисления при взаимодействии с кислородом.

Пенистость

При взбалтывании урины здорового человека не должна образовываться пена, если же она появляется, то отличается своей нестойкостью и прозрачностью. При образовании стойкой пены и утрате прозрачности можно сделать предположение о развитии желтухи либо присутствии белка.

Прозрачность

В норме прозрачность выделяемой жидкости должна быть максимально приближена к абсолютной. Мутность ее обусловлена наличием форменных элементов крови, микроорганизмов, слизи, гноя, солей, жиров и прочих веществ, которые не должны определяться либо в норме содержатся в незначительном количестве. Наличие в урине вышеуказанных включений определяется при применении специальных способов (соединение с различными кислотами, нагревание и т. д.).

Если в выделяемой жидкости выявлены лейкоциты, эритроциты, эпителиальные клетки или белок, то это может указывать на пиелонефрит, простатит, цистит, мочекаменную болезнь (МКБ) и другие опасные патологии мочеполовых органов. При диагностировании в осадке солей можно сделать вывод о присутствии фосфатов, уратов или оксалатов.

Моча здорового человека должна быть прозрачной

Подготовка к исследованию

Длительной предварительной подготовки пациента к сдаче трехстаканной пробы не требуется. Все необходимые предварительные процедуры проводятся утром в день сбора материала и сдачи анализа.

Заранее необходимо подготовить три чистые стерильные емкости, которые следует пронумеровать соответственно их порядковым номерам (1, 2 и 3). Нумерация на емкостях должна быть четкой и понятной, что не позволит перепутать их в процессе транспортировки.

Не рекомендуется использовать емкости, ранее бывшие в употреблении, это может снизить диагностическую ценность исследования. Лучше всего приобрести специально предназначенную для этого тару в ближайшей аптечной сети.

Рисунок 1 — Стерильный контейнер для сбора мочи

Если нет возможности купить готовые стерильные контейнеры, то можно использовать емкости с расширенным горлышком. Сбор мочи осуществляется сразу в ту баночку, которая впоследствии будет доставляться в лабораторию, без последующих переливаний.

Перед сдачей мочи необходимо:

1. 1Воздержаться от мочеиспускания в течении 5-6 часов, оптимально использовать первую утреннюю мочу.
2. 2Произвести гигиену наружных половых органов теплой водой, без использования мыла и дезинфектантов.
3. 3Открыть и поставить на устойчивую поверхность контейнеры для сбора материала, соответственно их порядковым номерам.
4. 4Мужчинам перед мочеиспусканием необходимо полностью отодвинуть кожную складку и обнажить отверстие уретры. Женщинам – раздвинуть половые губы, желательно закрыв тампоном вход во влагалище. Собирать мочу во время менструаций не следует. Даже собранная за один-два дня до менструации моча может быть диагностически не информативной.
5. 5Тяжелых неходячих или парализованных больных подмывают теплой водой спереди назад, затем вытирают насухо стерильным марлевым тампоном, стерильной салфеткой или одноразовым полотенцем. Вытирание также производится в направлении спереди назад.
6. 6Если вы регулярно принимаете медикаменты, необходимо предупредить об этом своего лечащего врача перед интерпретацией результата или перед назначением анализа. Отмену лекарственных средств, даже если они обладают свойством менять цвет мочи, проводить не следует. Современные диагностические аппараты с легкостью дифференцируют изменение мочи в результате патологии мочевыделительной системы с изменениями при приеме лекарственных средств.
7. 7Если целью назначения трехстаканной пробы является диагностика заболеваний простаты, то перед мочеиспусканием можно выполнить массаж предстательной железы для повышения информативности анализа.

Нормальные значения у детей

Перечень рассматриваемых показателей тот же, что и у взрослых. Отличия в нормах и расшифровка значений анализа мочи у детей приведены в таблице:

Остальные параметры исследования не имеют особых отличий от аналогичных у взрослого.

Белки плазмы и сыворотки крови

Плазма
содержит 2,5-8,0% белка, в том числе
фибриногена – 0,5%. У разных видов животных
содержание белка в плазме составляет
следующие величины, в %: куры – 5,2; кролики
– 7,1; коровы – 7,5; лошади – 7,8; свиньи –
7,4.

Содержание
белка в сыворотке крови колеблется в
зависимости от возраста, пола,
продуктивности. Снижение содержания
белка – гипопротеинемия наблюдается
при белковом голодании, при приеме
больших количеств жидкости, нарушении
функции почек, печени, неполноценном
белковом питании, повышенном распаде
белков. При сильных поносах и рвоте
концентрация белков в крови повышается
(гиперпротеинемия). При электрофорезе
в полиакриламидном геле белки крови
можно разделить до 30 и более фракций.

Альбумины
имеют повышенную электрофоретическую
подвижность,
хорошо растворимы в воде, на 98% состоят
из аминокислот. Изоэлектрическая точка
при рН 4,9; М.м. 65000-70000 Да; период полураспада
3,7 суток. В крови 30-55% белков – альбумины.

Синтезируются
в основном в клетках печени. Они участвуют
в регуляции водно-солевого обмена между
кровью и тканями. Альбумины можно
рассматривать как аминокислотный резерв
организма. Кроме того, они адсорбируют
аминокислоты и в таком виде транспортируют
их в ткани.

Альбумины
могут образовывать различные комплексы
с металлами, гормонами, витаминами,
токсинами, осуществляя их транспорт в
организме. В этих комплексах многие
биологически активные вещества теряют
свою активность или, наоборот, усиливают,
т.е. альбумины регулируют влияние их на
метаболические процессы. Выступают в
виде буферных веществ, поддерживая рН.

Глобулины.
Различают α, β, γ-глобулины.

α-Глобулины
при электрофорезе продвигаются за
альбуминами, разделяются на несколько
фракций (α₁,
α₂,
α₃
-глобулины). М.м. 160000 — 200000. Изоэлектрическая
точка при рН 4,7-5,2. Их функция –
белки-переносчики, (легко соединяются
с липидами, углеводами, витаминами,
желчными пигментами). В их составе 25-35%
углеводов. Сюда относится гаптоглобулин
– переносчик железа, церулоплазмин –
переносчик меди.
Церулоплазмин, относящийся к
α₂-гликопротеидам
плазмы крови, играет главную роль в
обмене медьсодержащих энзимов. Во
фракции α-глобулинов находятся также
белки, участвующие в свертывании крови.

β-Глобулины.
Молекулярная масса 90000-1,Зх106
Да. Изоэлектрическая точка рН 4,4. Образуют
комплексы с липидами. К этой группе
относится трансферрин. В этой фракции
находится белок проконвертин, участвующий
в превращении протромбина в тромбин.

γ-Глобулины.
Наименее подвижная фракция с высокой
М.м., выполняют защитные функции. В их
составе белки-антитела, обеспечивающие
защиту против инфекционных болезней.

Иммунные
белки – иммуноглобулины (Ig).
Содержание иммуноглобулинов резко
увеличивается при иммунизации, хронических
заболеваниях. Иммуноглобулины
синтезируются в лимфоидной ткани
селезенки, лимфоузлов, костного мозга
и т.д. против чужеродных белков (антигенов).
Их молекулярная масса составляет до
Ix106
Да и более. Состоят из двух тяжелых
полипептидных цепей (H-Heavy,
Мм 50-75 кДа) и двух легких цепей
L
(Light,
Мм 23 кДа), соединенных дисульфидными
мостиками, (рис. 14.1.). Н-цепи имеют ≈ 700,
а L-цепи
≈ 200 аминокислотных остатков. В пептидных
цепях различают вариабельные (v)
и постоянные константные (с) области. В
результате различных сочетаний отдельных
участков иммуноглобулинов может
образовываться большое число индивидуальных
иммуноглобулинов
— до 107
.

Рис. 14.1. Структура
молекулы иммуноглобулина.

Две
легкие и две тяжелые цепи удерживаются
вместе дисульфидными связями. Каждая
из легких и тяжелых цепей имеет на своем
N-
конце вариабельный yчасток
(V_L
или V_H).
B
состав легких цепей входит один
константный участок (C_L);
у тяжелых цепей константная часть
состоит из четырех доменов (С_Н1,
С_Н2,
СнЗ и шарнирный участок).

Различают
иммуноглобулины классов IgG,
M,
A,
D,
E.
Они различаются по молекулярной массе,
по скорости седиментации, концентрации
в сыворотке крови и т.д.

В
сыворотке крови содержатся и другие
белки. Например, C-реактивный
белок появляется при воспалительных
процессах и некрозах. Пропердин и
интерферон – защитные белки. Интерферон
является универсальным противовирусным
белком.
Фибриноген
и протромбин принимают участие в процессе
свертывания крови. В небольших количествах
в сыворотки крови содержатся гормоны
и ферменты.
Металлопротеиды
– целый ряд белков крови способных
связывать
различные металлы, образуя комплексные
соединения: церулоплазмин – М.м. 150 кДа,
8 атомов Cu++
, трансферрин, гаптоглобин и другие.

Изучение морфологии зрелых эритроцитов и различных лейкоцитов нормальной крови в окрашенных мазках

Структурные особенности форменных элементов крови изучают в тонких местах окрашенных препаратов иммерсионной системой микроскопа.

В препаратах крови здоровых людей обнаруживают: эритроциты, лейкоциты (палочкоядерные и сегменто-ядерные нейтрофилы. эозинофилы, базофилы, лимфоциты, моноциты) и тромбоциты.

Зрелый эритроцит (рис. 32, эр) — круглая или слегка овальная клетка, не содержащая ядра. Окрашивается в розовый цвет. В связи с тем что эритроцит имеет двояковогнутую форму, центр его представляется окрашенным слабее, чем периферия.

Метамиелоцит — юный нейтрофил (рис. 32, М). Клетка круглой формы. Цитоплазма окрашена в розоватый цвет и содержит  пылевидную светло-фиолетовую (нейтрофильную) зернистость. Ядро почковидное, имеет гладкий контур без сужений, неравномерно окрашивается в оттенки фиолетового цвета, располагается ближе к периферии клетки.

Нейтрофил палочкоядерный (рис. 32, П) — клетка круглой формы. Цитоплазма розоватого цвета, содержит пылевидную светло-фиолетовую (нейтрофильную) зернистость. Характерным для этой клетки является наличие ядра, напоминающего жгут или палочку, изогнутую в виде букв S, С, Г и др. Ядро на всем своем протяжении не имеет сужений и окрашивается в фиолетовый цвет различной интенсивности.

Нейтрофил сегментоядерный (рис. 32, С) — круглой формы клетка с розовато окрашенной цитоплазмой, в которой имеется светло-фиолетовая (нейтрофильная) зернистость. Ядро разделено на 2-5 сегментов, соединенных между собой тонкими одноконтурными перемычками, окрашивается в фиолетовый цвет различной интенсивности. Иногда у абсолютно здоровых людей встречаются нейтрофилы, содержащие короткое палочковидное или двухсегментное интенсивно окрашенное ядро (рис. 33). Это так называемый пельгеровский вариант строения ядер гранулоцитов.

Эозинофил (рис. 32, Э) — клетка круглой формы. Характерным является ярко-розовая (эозинофильная) обильная крупная зернистость, обычно заполняющая всю цитоплазму. Ядро чаще двухсегментное и окрашивается в фиолетовый цвет различной интенсивности.

Базофил сегментоядерный — «тучная» клетка (рис. 32, Б) округлой формы. Цитоплазма окрашивается в розоватый с фиолетовым оттенком цвет и содержит крупную темно-фиолетовую (базофильную) неравномерную по форме и величине зернистость, нередко накладывающуюся на ядро. Ядро чаще бесструктурное, окрашено в темно-фиолетовый цвет и напоминает лист клена или трилистника; реже встречаются ядра с односторонним глубоким вдавлением, круглые и овальные.

Лимфоцит (рис. 32, JI) — клетка округлой формы. Ядро занимает большую часть клетки, оставляя лишь узкий ободок синеватой цитоплазмы в виде полумесяца. Оно круглое, иногда с небольшим вдавлением; окрашивается более интенсивно, чем ядра гранулоцитов; иногда в ядрах лимфоцитов различают ядрышки.

Лимфоциты отличаются от других клеток наличием перинуклеарной зоны, которая менее выражена у лимфоцитов большего размера. В цитоплазме некоторых лимфоцитов обнаруживаетя азурофильная (розовато-фиолетовая) зернистость.

Моноцит (рис. 32, Ион) — наиболее крупная клетка нормальной крови. Ядро различной формы (овальное, подковообразное, грибовидное), окрашивается слабее ядер описанных выше клеток. Соотношение между ядром и цитоплазмой приблизительно 1:1. Цитоплазма окрашивается в голубовато-серый цвет и обычно не содержит зернистости.

Расшифровка анализа мочи у взрослых: норма

Во время лабораторного исследования изучают физико-химические показатели урины: цвет, прозрачность, запах, удельный вес, эритроциты, белок, лейкоциты, нитриты, глюкозу. А также проводят микроскопию осадка с целью выявления грибков, слизи, бактерий, кристаллов и другое. В ходе анализа при помощи приборов и визуально медики оценивают:

1. Прозрачность – нормальный биоматериал всегда прозрачный. Наличие мути свидетельствует о включениях, которые находятся в урине – соли, белок, слизь и другое.
2. Цвет – зависит от наличия пигментов и способен меняться в зависимости от употребляемой пищи и количества выпитой жидкости. Кроме того, при некоторых заболеваниях урина приобретает различный оттенок – красный, черный, белый и прочий.
3. Запах – в нормальном анализе мочи он имеется всегда. Однако, зловонный, гнилостный или напоминающий аммиак, указывает на патологические процессы, протекающие в организме.
4. Белок – для его выявления в мочу добавляют специальный реактив. Помутнение указывает на его присутствие.
5. Кислотность – для ее определения используют лакмусовую бумагу. В норме среда кислая, а щелочная встречается у вегетарианцев.
6. Плотность – на этот показатель оказывает влияние состав и количество компонентов мочи.
7. Глюкозу – для определения используют тест-полоски. В норме ее не должно быть.
8. Исследование осадка – урину отстаивают в течение двух часов, а далее, центрифугируют.

Медики оценивают результаты этого анализа в комплексе с другими лабораторными исследованиями.

Физико-химические свойства урины

Когда проводится анализ, рассматривается несколько различных параметров этой биологической жидкости. Вот примерный список таких параметров и характеристики мочи, которые говорят, что человек не болеет:

1. Цвет здоровой урины жёлтый, при этом она должна иметь соломенно-жёлтый оттенок и быть прозрачной.
2. Запах трудно описать, но он узнаваем и носит специфический характер.
3. Удельный вес урины немного больше, чем у воды. Он составляет от 1005 до 1028 г/л.
4. Реакция среды должна находиться в пределах от 5,0 до 7,0.
5. Определённые вещества не должны присутствовать в здоровой биожидкости. Речь идёт об общем белке, билирубине, глюкозе, кетонах и о жёлчных кислотах.
6. Не должно в моче быть эритроцитов.
7. Лейкоцитов в поле зрения не более 6.
8. Слизь, а также клетки эпителия могут встречаться, но такие случаи должны быть единичными.
9. Кристаллы или цилиндры солей, а также бактерии встречаться в биожидкости не должны.

Если характеристики диагностики именно таковы, то речь идёт о здоровом организме. Если же речь о тех, кто болен, регулярная сдача такого анализа и диагностика результатов помогут контролировать состояние организма.

В продаже в аптеках имеются специальные тестовые полоски. Они могут дать предварительную, приблизительную информацию о составе биожидкости. Для выполнения исследования предоставленную полоску помещают в жидкость и она меняет цвет в зависимости от состава. В комплекте имеется цветовая таблица, которая поможет интерпретировать полученный цвет.

Одним из наиболее продуктивных способов работы является изучение мочевого осадка под микроскопом. При этом имеет место визуальное определение различных форм, которые там могут присутствовать.

Обычно для проведения такого изучения достаточно, чтобы урина простояла в течение двух часов. В результате отложится осадок, который можно будет изучить.

Часто данный вид исследования требует дополнительных уточнений и является фактически первым этапом исследования.